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龙图腾网恭喜江苏大学申请的专利一种集成智能手机平台的双酚A的双信号免疫分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114910646B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-23发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210581500.3，技术领域涉及：G01N33/577；该发明授权一种集成智能手机平台的双酚A的双信号免疫分析方法是由张祯;韦达理;朱暖飞;熊定辉;汪颖;李铭炜设计研发完成，并于2022-05-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种集成智能手机平台的双酚A的双信号免疫分析方法在说明书摘要公布了：本发明属于食品安全和环境监测技术领域，公开了一种集成智能手机平台的双酚A的双信号免疫分析方法。包括如下步骤：1制备能特异性识别双酚A的免疫探针CPNs@ZIF‑8@Ab；2合成包被原包覆的免疫磁珠探针；3制备金纳米簇GSH‑AuNCs的荧光凝胶传感器和TMB的比色凝胶传感器；4将上述元件组装获得Lab‑in‑a‑tube装置；5利用Lab‑in‑a‑tube装置实现环境样品中BPA的超灵敏检测，并获得比色与荧光双信号；6基于智能手机上的颜色识别应用程序APP将比色信号和荧光信号转化为RGB值以定量分析BPA。本发明构建了一种集成智能手机平台的Lab‑in‑a‑tube装置实现了BPA的现场快速检测，该装置具备便携、易操作、可视、灵敏等优点，具备巨大的实用价值。

本发明授权一种集成智能手机平台的双酚A的双信号免疫分析方法在权利要求书中公布了：1.一种集成智能手机平台的双酚A的双信号免疫分析方法，其特征在于，包括如下步骤：1过氧化铜纳米点CPNs的制备：室温下将二水合氯化铜CuCl2·2H2O水溶液和聚乙烯吡咯烷酮PVP在超声状态下混合均匀，随后，在上述混合液中依次加入氢氧化钠水溶液和过氧化氢，并继续搅拌，最后经超滤纯化和冷冻干燥获得过氧化铜纳米点，并室温保存；2免疫探针CPNs@ZIF-8@Ab的制备：将步骤1所得的CPNs分散于含2-甲基咪唑的甲醇溶液，然后加入乙酸锌甲醇溶液，室温下搅拌，将BPA单克隆抗体溶液和BSA封闭溶液依次加入到上述混合溶液中，继续搅拌，随后，离心收集产物并用水洗涤数次，最后，免疫探针分散于PBS缓冲液中保存备用；其中，CPNs，含2-甲基咪唑的甲醇溶液，乙酸锌甲醇溶液，BPA单克隆抗体溶液，BSA封闭溶液的用量比为20mg：2mL：2mL：50μL：10μL；其中，含2-甲基咪唑的甲醇溶液中2-甲基咪唑的浓度为160mM，乙酸锌甲醇溶液的浓度为40mM；BPA单克隆抗体溶液的浓度为0.1mgmL；BSA封闭溶液的浓度为1wt.％；PBS缓冲液的的浓度为10mM；3金纳米簇GSH-AuNCs的制备：将谷胱甘肽水溶液GSH与氯金酸HAuCl4溶液混合并室温搅拌，随后加入超纯水，70℃下搅拌过夜，收集GSH-AuNCs并室温保存备用；4包被原包覆的免疫磁珠Antigen-labelledIMBs的制备：室温下，在吗啡乙磺酸缓冲液MES中加入免疫磁珠混合均匀，再加入1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚NHS，活化羧基基团，随后，去除多余的EDC和NHS，并加入PBS缓冲液稀释的抗原溶液，轻摇过夜，用PBST缓冲液洗涤数次，收集Antigen-labelledIMBs，并重悬于含BSA的PBS缓冲液中，保存备用；5凝胶传感器的制备：将琼脂糖溶解于H2O中并用微波炉加热，直至琼脂糖完全融化，将3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液TMB加入上述琼脂糖中，连续搅拌数分钟后将凝胶转移至离心管A的管帽中冷却，获得比色凝胶传感器并保存备用；与此同时，用步骤3的GSH-AuNCs替换上述TMB，将GSH-AuNCs溶液加入上述琼脂糖中，连续搅拌数分钟后将凝胶转移至离心管B的管帽中冷却，获得荧光凝胶传感器；6基于Lab-in-a-tube装置检测双酚A：分别在含有PBS缓冲液的离心管A或离心管B中加入步骤4所得的Antigen-labelledIMBs；随后加入不同浓度的BPA标准品和步骤2所得的CPNs@ZIF-8@Ab免疫探针，常温孵育，孵育完成后，经磁铁分离，并用PBST缓冲液洗涤数次，加入酸性溶液诱导CPNs分解并调节pH，将离心管A或离心管B倒置反应数分钟，最后，分别在日光灯和紫外灯下观察比色和荧光结果并进行定性分析；同时，在颜色识别器应用程序APP的支持下，对比色和荧光信号进行RGB分析，以BPA浓度为横坐标，RedGreen通道比值为纵坐标，建立BPA检测的比色和荧光双信号标准曲线；其中，PBS缓冲液、Antigen-labelledIMBs、BPA标准品、CPNs@ZIF-8@Ab免疫探针的用量比为30μL：20μL：50μL：50μL；PBS缓冲液的浓度为10mM，BPA标准品的浓度为0-5ngmL；洗涤过程中所用PBST缓冲液为含有0.05％Tween-20的PBS溶液；所述酸性溶液为稀盐酸溶液，调节pH值至5；7实际样品中BPA的测定：将实际液体样本离心后采集上清液，将上清液替代步骤6中的BPA标准品，重复步骤6的操作，得到上清液的RGB值和RedGreen通道比值，带入比色和荧光双信号标准曲线，得出实际液体的BPA浓度。

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