恭喜中国水产科学研究院黄海水产研究所徐文腾获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国水产科学研究院黄海水产研究所申请的专利一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119410764B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510030965.3,技术领域涉及:C12Q1/6879;该发明授权一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方法是由徐文腾;胡鹏;孟振;李明设计研发完成,并于2025-01-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方法,涉及生物检测技术领域。该快速检测草鱼幼鱼性别的方法,具体包括以下步骤:步骤1、样品获取:获取草鱼数尾,以性腺形态确定雌雄个体并分别对雌雄个体进行组织样品的提取并低温保存;步骤2、提取待测样品的总DNA:利用TIANampMarineAnimalsDNAkit试剂盒提取3尾雌鱼和3尾雄鱼的肌肉组织基因组DNA,NanoDrop2000超微量分光光度计测量DNA的浓度和OD260OD280比值,1.0%琼脂糖电泳检测DNA的完整性;步骤3、引物检测。本发明提出的引物和检测方法可避免常规杀鱼取性腺难度较大,取出的性腺也需要做石蜡切片才能鉴别雌雄,过程繁琐,实现了仅需通过一次PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测即可鉴定草鱼幼苗性别。
本发明授权一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方法在权利要求书中公布了:1.一种快速检测草鱼幼鱼性别的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:步骤1、样品获取:获取草鱼数尾,以性腺形态确定雌雄个体并分别对雌雄个体进行组织样品的提取并保存于-20℃冰箱;步骤2、提取待测样品的总DNA:利用TIANampMarineAnimalsDNAkit试剂盒提取3尾雌鱼和3尾雄鱼的肌肉组织基因组DNA,NanoDrop2000超微量分光光度计测量DNA的浓度和OD260OD280比值,1.0%琼脂糖电泳检测DNA的完整性;步骤3、引物检测:采用引物为CL-2FCL-2R对待检测样品进行PCR扩增,对扩增所得产物以琼脂糖凝胶电泳图中的扩增条带显隐,进行检测确定待测样品的性别;其中,CL-2F:5’-AGATGTCCTCGTGAAGTCAA-3’;CL-2R:5’-CATAACAGAGCCTAAGTGCC-3’;所述PCR扩增的扩增反应体系为:PCR反应体系50μL,包括2×TaqPCRMasterMix25μL,DNA1μL,引物F1μL,引物R1μL,ddH2O22μL;将PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳检测观察,120V电压条件下跑胶30分钟,将琼脂糖凝胶放入凝胶成像系统观察条带有无,进而确定待测样品的性别;所述步骤3中确定待测样品的性别的方法包括,利用琼脂糖凝胶电泳检测所述PCR扩增产物,所得到的琼脂糖凝胶电泳图中,含有该扩增条带则判断所述待测样品为雄性。
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