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龙图腾网恭喜南京邮电大学申请的专利一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119534416B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510107757.9，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法是由丁显光;余振飞设计研发完成，并于2025-01-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法，步骤如下：将LPS加到巨噬细胞中，孵育，得极化巨噬细胞；从极化巨噬细胞中提取EV；将磷脂酰胆碱溶于氯仿‑甲醇混合溶剂，旋转蒸发，得脂质体薄膜；将PBS和混合药液加到含脂质体薄膜的烧瓶中，混合，使薄膜水化；水化后脂质体经滤膜挤压、离心，收集沉淀；沉淀用pbs分散后，再次离心，取上清，得脂质体溶液；在EV中加DIL，孵育后离心，收集沉淀，用PBS重悬；取重悬液与脂质体溶液混合，孵育；用倒置荧光显微镜进行成像。本发明通过脂质体与EV囊泡的膜融合实现对囊泡内部信息的荧光检测与分析，避免采用现有方法带来的膜结构损害、内容物泄漏、操作难度大等问题。

本发明授权一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法在权利要求书中公布了：1.一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将脂多糖LPS加入到巨噬细胞中，共孵育培养，得极化巨噬细胞；（2）利用差速离心法从步骤（1）的极化巨噬细胞中提取细胞外囊泡EV；（3）将磷脂酰胆碱溶解于氯仿-甲醇混合溶剂，并经旋转蒸发，形成脂质体薄膜；将3.5mlPBS缓冲液和1.5ml混合药液加入到含脂质体薄膜的烧瓶中，震荡混合，使薄膜水化；混合药液的组成为：浓度3.36mM的NADPH250ul+浓度5mM的L-精氨酸1ml+50ul一氧化氮荧光探针+200ul氢氧化钠；水化后的脂质体溶液经滤膜挤压、离心，收集沉淀；沉淀用pbs分散后，再次离心，取上清液，得所需脂质体溶液；（4）在步骤（2）所得的EV中加入DIL染料，震荡孵育后离心，收集沉淀，用PBS重悬；接着，取重悬液与步骤（3）的脂质体溶液混合，震荡孵育；（5）用倒置荧光显微镜进行成像。

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