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龙图腾网恭喜遵义医科大学申请的专利一种血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃的萃取方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115656379B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211393344.4，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃的萃取方法是由周远忠;陶琳;田应宽;廖登青;安松林;刘湘;陈薇;赵磊设计研发完成，并于2022-11-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃的萃取方法在说明书摘要公布了：本申请公开了血液检测技术领域的一种血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃的萃取方法，包括S1，准备标准试剂，S2，制备贮备液；S3，制备内标液；S4，配制混标溶液；S5，混标1～混标6溶液和对照溶液的配制；S6，血液前处理；b1，解冻；b2，标准品配制；b3，水解b4，一次萃取；b5，二次萃取；b6，三次萃取，第二轮萃取；S7，氮吹；S8，衍生化；S9，上样分析。采用本方案中的监测方法，从血液样品中一共检测出20中物质，其中多环芳烃代谢物OH‑PAHS有十种，分别为1‑OHNAP、2‑OHFLU、3‑OHPHE、9‑OHPHE、1‑OHPHE、2‑OHNAP、4‑OHPHE、1‑OHPYR、2‑OHPHE、9‑OHFLU。邻苯二甲酸酯代谢物PAEs10种，分别为MECPP、MEOHP、MMP、MBP、MEHHP、MEP、MOP、MBZP、MEHP、MIBP。有效的检测出了血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃。

本发明授权一种血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃的萃取方法在权利要求书中公布了：1.一种血液中邻苯二甲酸酯和多环芳烃的萃取方法，其特征在于：包括以下步骤：S1，准备标准试剂：依序准备试剂标准试剂；1-萘酚、2-萘酚、2-羟基芴、9-羟基芴、9-羟基菲、1-羟基芘、1-羟基菲、2-羟基菲、3-羟基菲、4-羟基菲、邻苯二甲酸单乙基己基酯、邻苯二甲酸单乙酯、邻苯二甲酸单甲酯、邻二甲酸单辛酯、邻苯二甲酸单苄酯、苯二甲酸单异丁酯、邻苯二甲酸单丁酯、单-邻苯二甲酸、邻苯二甲酸单酯和邻苯二甲酸单酯；S2，制备贮备液：取14个10ml棕色容量瓶，分别编号2、3、4、7、8、9、10、11、12、13、14、15、21、22；使用1ml移液枪吸0.5ml乙腈注入到对应上述编号的标准试剂的试剂瓶中，然后进行吹打混匀后分别将其吸到对应编号的容量瓶中，重复上述步骤四次后再用乙腈定容到10ml；再取6个2ml棕色进样瓶，分别编号1、5、6、18、19、20，用200μl移液枪吸取200μl乙腈到对应编号标准试剂的包装瓶中，并吹打混匀后吸到对应编号的进样瓶中，重复该步骤四次，然后再加入乙腈将编号1、5、6的进样瓶定容为1ml，编号18、19、20的进样瓶定容为1.25ml；S3，制备内标液：分别取480ul浓度为0.25mgml的1-OHP-d9贮备液与240ul浓度为5mgml的1-OHNa-d7贮备液，1.2ml浓度为100ugml的MEHP-c4，以及1.2ml浓度为100ugml的MEHHP-c4，用乙腈定容至24ml，四者的混合溶液即为内标溶液，1-OHNa-d7终浓度为50.9ugml，1-OHP-d9,MEHP-c4和MEHHP-c4终浓度为5ugml；S4，配制混标溶液：取1根10ml离心管，加入1ml乙腈并标记为混标7，用20μl和50μl移液器将各标准试剂的贮备液移入至10ml离心管，然后用乙腈定容至5ml，至漩涡器上混匀，配成混标溶液；S5，混标1~混标6溶液和对照溶液的配制：a1,准备器具：取7根5ml离心管，分别标号为：混标1，混标2，混标3，混标4，混标5，混标6，对照0；a2,混标6的制备：取1.5ml步骤S4中的混标7溶液和1.5ml乙腈加入混标6管，至漩涡器上混匀1min，配成混标6；a3,混标5的制备：取1ml步骤S4中的混标7溶液和4ml乙腈加入混标5管，至漩涡器上混匀15s，3次，配成混标5；a4,混标4的制备：取2ml混标5和2ml乙腈加入混标4管，至漩涡器上混匀15s，3次，配成混标4；a5，混标3的制备：取1ml混标4和4ml乙腈加入混标3管，至漩涡器上混匀15s，3次，配成混标3；a6,混标2的制备：取2ml混标3和2ml乙腈加入混标2管，至漩涡器上混匀15s，3次，配成混标2；a7,混标1的制备：取1.5ml混标2和1.5ml乙腈加入混标1管，至漩涡器上混匀15s，3次，配成混标1；a8,对照0溶液的制备：取3ml乙腈加入对照0管，作为空白对照；S6，血液前处理：b1，解冻：将血液从冰箱中取出后进行解冻，然后摇匀并静置；b2，标准品配制：取8根10ml圆底塑料离心管，标号为B0~B7，B0~B7每管加分别1ml纯水、20μl上述混标溶液，B0管加对照O,B1管加混标1，B2管加混标2，B3管加混标3，B4管加混标4，B5管加混标5，B6管加混标6,B7管加混标7；b3，水解：用1ml移液器取1ml血液加入10ml圆底塑料离心管中，血样和标准品都加入20ul内标溶液，加入2mlMgSO4•7H20，置多管漩涡混合器上摇匀10min，3500rmin,至无沉淀；b4，一次萃取：逐个加入1ml乙酸乙酯，离心10min，转速4000rpm，取上清液至新的5ml离心管；b5，二次萃取：再次往10ml的离心管中逐个加入1ml正己烷和乙醚，体积比4:1，置多管漩涡仪混匀15S，离心10min转速4000rpm，取出上清液至5ml圆底离心管；b6，三次萃取：分别用上述1ml正己烷和乙醚，体积比4:1，置多管漩涡仪混匀15S，离心10min转速4000rpm，取出上清至5ml圆底离心管；b7，完成3次萃取过程后，将存入5ml离心管内的有机相放在氮吹仪上用高纯氮气吹干，吹干直接后加入1ml乙酸钠缓冲液和50ul的β-glucuronidasesulphatase酶，100μl移液器，白色枪头，吹打以洗净枪头的残留，将盖子盖紧，置漩涡仪混匀1min后置于37℃水浴锅中水浴90min；b8，取出充分酶解的样本，然后将水浴锅的温度设置为90℃，备用，进行第二轮萃取；b9，第二轮萃取：1次萃取，逐个加入1ml乙酸乙酯，在通风橱加样，置多管漩涡混合器上摇匀10min，3500rmin,至无沉淀，离心10min转速4000rpm，取上清至新的5ml离心管；2次萃取，再次往10ml的离心管中逐个加入上述1ml正己烷和乙醚，体积比4:1，置多管漩涡仪混匀15S，离心10min转速4000rpm，取出上清至5ml圆底离心管；3次萃取，分别用上述1ml正己烷和乙醚，体积比4:1，漩涡15s，离心10min，转速4000rpm，取出上清至5ml圆底离心管；S7，氮吹：在完成两轮萃取过程后，将存入5ml离心管内的有机相放在氮吹仪上用高纯氮气吹浓缩至约250ul，然后逐个移至内插管中，再次移入氮吹仪中并用高纯氮气吹干；S8，衍生化：在每个内插管中分别加入等量100ul的硅烷化试剂，盖紧瓶盖，然后将其置于水浴锅中，温度设定为90℃，45min，使其充分衍生化；S9，上样分析：水浴结束后室温下冷却后进行气相色谱-质谱分析。

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