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龙图腾网恭喜中国科学院西北高原生物研究所申请的专利一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117099685B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311280889.9，技术领域涉及：A01H4/00；该发明授权一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法是由徐文华;李彩霞;马世震;刚华本;宋文珠;宁蓉春;王娜;多杰措设计研发完成，并于2023-10-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法。本发明的方法以五脉绿绒蒿的茎尖为外植体，经氯化汞溶液浸泡灭菌、冲洗，即得消毒后的外植体茎尖；将消毒后的外植体茎尖先接种在无激素培养基上，后接种在诱导芽分化培养基上形成2～3个丛生芽；将丛生芽接种到继代增殖培养基上培养形成五脉绿绒蒿丛生苗；后将五脉绿绒蒿丛生苗分株后转入生根培养基中培养，形成完整再生小苗；最后将完整再生小苗移栽至育苗基质中，炼苗后即长成正常五脉绿绒蒿植株。本发明方法克服了五脉绿绒蒿育苗生长周期过长、繁殖系数低的问题，易于操作、可进行工厂化快速育苗。

本发明授权一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法在权利要求书中公布了：1.一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法，其特征在于，具体包括如下步骤：步骤1，外植体的选择和处理：以五脉绿绒蒿的茎尖为外植体，经流水冲洗15～30分钟，用无菌去离子水冲洗4～5次，再将冲洗后的外植体置于质量浓度为0.2％的氯化汞溶液中，浸泡灭菌4～5分钟，并用无菌去离子水冲洗4～6次，最后用无菌滤纸吸干水分即得消毒后的外植体茎尖：步骤2，外植体接种：将所述消毒后的外植体茎尖先接种在无激素培养基上，7～15天后接种至诱导芽分化培养基上，其中每25ml所述诱导芽分化培养基中接种2～3棵消毒后的外植体茎尖；在温度为23℃±2℃、光源为日光灯、光强为30～60umol.m-2.s-1、光照时间为12h.d-1的条件下培养25～30天，使茎尖基部形成2～3个丛生芽；所述无激素培养基指在1000ml的烧杯中，依次加入大量元素母液100ml，微量元素母液10ml，有机成分母液10ml，铁盐母液5ml，柠檬酸母液4ml，Vc母液2ml，蔗糖30克，后加双蒸馏水至1000ml刻度处，搅匀后，加入1mMNaOH溶液调整pH值至5.8，最后加入琼脂粉5.0克，在100ml三角瓶中每25ml分装为一瓶，经121℃高温消毒即得；所述诱导芽分化培养基指在1000ml的烧杯中，依次加入大量元素母液100ml，微量元素母液10ml，有机成分母液10ml，铁盐母液5ml，柠檬酸母液4ml，Vc母液2ml，蔗糖30克，浓度为0.1mgml的6-苄氨基腺嘌呤母液20ml，浓度为0.1mgml的萘乙酸母液10ml，后加双蒸馏水至1000ml刻度处，搅匀后，加入1mMNaOH溶液调整pH值至5.8，最后加入琼脂粉5.0克，在100ml三角瓶中每25ml分装为一瓶，经121℃高温消毒即得；步骤3，继代增殖培养：将所述2～3个丛生芽接种到继代增殖培养基上，其中每25ml所述继代增殖培养基中接种1～2个所述丛生芽；在温度为23℃±2℃、光源为日光灯、光强为30～60umol.m-2.s-1、光照时间为12h.d-1的条件下培养25～35天，形成五脉绿绒蒿丛生苗；所述继代增殖培养基指在1000ml的烧杯中，依次加入大量元素母液100ml，微量元素母液10ml，有机成分母液10ml，铁盐母液5ml，柠檬酸母液4ml，Vc母液2ml，蔗糖30克，浓度为0.1mgml的6-苄氨基腺嘌呤母液10ml，浓度为0.1mgml的玉米素母液5ml，后加双蒸馏水至1000ml刻度处，搅匀后，加入1mMNaOH溶液调整pH值至5.8，最后加入琼脂粉5.0克，在100ml三角瓶中每25ml分装为一瓶，经121℃高温消毒即得；步骤4，生根诱导：将五脉绿绒蒿丛生苗长至3～4cm时分株，将生长旺盛的苗从丛生苗中分剥下来，然后转入生根培养基中，其中每25ml所述生根培养基中接种2～3棵所述五脉绿绒蒿丛生苗；在温度为23℃±2℃、光源为日光灯、光强为30～60umol.m-2.s-1、光照时间为12h.d-1的条件下培养20～30天后，丛生苗基部出现白色、粗壮短根，并长出完整根系，即得完整再生小苗；所述生根培养基是指在1000ml的烧杯中，依次加入大量元素母液50～100ml，微量元素母液5～10ml，有机成分母液5～10ml，铁盐母液2.5～5ml，柠檬酸母液4ml，Vc母液2ml，蔗糖15～30克，浓度为0.1mgml的萘乙酸母液5～10ml，后加双蒸馏水至1000ml刻度处，搅匀后，加入1mMNaOH溶液调整pH值至5.8，最后加入琼脂粉6.0克，在100ml三角瓶中每25ml分装为一瓶，经121℃高温消毒即得；步骤5，育苗基质消毒：将腐殖质与珍珠岩按2：1重量比混合而成的混合基质，所述混合基质在115～121℃温度下进行高温消毒，15～20min后即得消毒后的育苗基质；所述育苗基质的总孔隙度为70～75％，有机质含量为20％；步骤6，植株移栽：将所述完整再生小苗直接移栽到所述消毒后的育苗基质中，炼苗后即长成正常五脉绿绒蒿植株；所述一棵完整再生小苗种植在所述消毒后的育苗基质10cm2的范围内；所述大量元素母液是指含有硝酸铵16.5gL，硝酸钾19.0gL，硫酸镁3.7gL，磷酸二氢钾1.7gL，氯化钙4.4gL的混合液；所述微量元素母液是指含有硫酸锰1.68gL，硫酸锌0.86gL，硼酸0.62gL，碘化钾0.083gL，钼酸钠0.025gL，硫酸铜0.0025gL，氯化钴0.0025gL的混合液；所述有机成分母液是指含有甘氨酸0.2gL，盐酸硫胺素0.04gL，盐酸吡哆醇0.05gL，烟酸0.05gL，肌醇0.1gL的混合液；所述铁盐母液是指含有硫酸亚铁5.58gL，Na2·EDTA·2H2O7.46mgL的混合液；所述柠檬酸母液是指含有柠檬酸10mgmL的溶液；所述Vc母液是指含有抗坏血酸1mgmL的溶液。

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