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龙图腾网恭喜杭州联川生物技术股份有限公司申请的专利一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117384825B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311585205.6，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用是由宋俊兴;王斌;郑圣晗;林建雄设计研发完成，并于2023-11-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用，所述酶解液，包括第一酶解液、第二酶解液，其中，第一酶解液包括80‑120Uml透明质酸酶和30‑80Uml链霉蛋白酶；第二酶解液包括1‑3mgml胶原酶II、0.3‑0.8mgml分散酶和0.05‑0.1mgml弹性蛋白酶；以及利用酶解液制备的试剂盒以及酶解方法，酶解液中包含的胶原酶均为常用的解离酶，获得方便，酶解液配比适用于人动脉组织的单细胞解离，试剂组分相容性较好，无有害成分，安全环保；使用本发明提供的解离方案可以获得高质量的单细胞悬液，可以大幅提升单细胞测序在动脉组织中应用的可行性。

本发明授权一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种用于单细胞测序的人动脉组织的单细胞悬液的制备方法，其特征在于，制备方法包括如下步骤：S1、取人动脉组织样本置于含有洗涤缓冲液的器皿中剪碎，剪碎后的组织块样本置于样本管a中用洗涤缓冲液反复清洗；S2、向样本管a中加入第一酶解液，封口膜密封后进行第一次消化；S3、用洗涤缓冲液润洗组织及细胞筛，并吸取S2中的细胞悬液通过细胞筛，并，细胞滤液离心后弃上清；筛网上的细胞组织置于样本管b中待用；S4、加入稀释缓冲液重悬细胞，随后加入红细胞裂解液，冰上裂解，离心后弃上清；用稀释缓冲液重悬细胞沉淀获得第一次酶解单细胞悬液；S5、向样本管b中加入第二酶解液，封口膜密封后进行第二次消化；S6、用洗涤缓冲液润洗组织及细胞筛，并吸取S5中的细胞悬液通过细胞筛，并，细胞滤液离心后弃上清；S7、加入稀释缓冲液重悬细胞，随后加入红细胞裂解液，冰上裂解，离心后弃上清；用稀释缓冲液重悬细胞沉淀获得第二次酶解单细胞悬液；S8、将第一次酶解单细胞悬液和第二次酶解单细胞悬液混合后即得人动脉组织的单细胞悬液；其中，第一酶解液包括100Uml透明质酸酶和50Uml链霉蛋白酶；第二酶解液包括2mgml胶原酶II、0.5mgml分散酶和0.08mgml弹性蛋白酶；洗涤缓冲液为PBS溶液；稀释缓冲液为1640培养基；第一次消化和第二次消化的方法为：放入37℃水浴锅中100rpm转速条件下消化20min，消化完成后轻柔吹打组织；所述离心方法为：400g，4℃，离心5min；所述细胞筛为70μm与30μm的组合细胞筛。

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