恭喜山东省农业科学院畜牧兽医研究所张亚冉获国家专利权
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龙图腾网恭喜山东省农业科学院畜牧兽医研究所申请的专利靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118956869B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411079682.X,技术领域涉及:C12N15/113;该发明授权靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株是由张亚冉;张清兰;高亚平;王秀革;肖遥;魏晓超;鞠志花;杨春红;姜强;王金鹏;刘文浩;黄金明设计研发完成,并于2024-08-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株在说明书摘要公布了:本发明提供了一种靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株。该sgRNA包括sgRNA1、sgRNA2,sgRNA的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2所示。本发明的sgRNA能够精确指导Cas9蛋白靶向切割牛乳腺上皮细胞TARDBP基因,采用该sgRNA构建获得的表达载体细胞转化率高,极大提高了敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的成功率,获得TARDBP基因敲除乳腺上皮细胞系。为便于研究TARDBP基因在奶牛的乳脂分泌和产奶方面的功能及其机制供了细胞模型,为奶牛生物育种奠定了基础。
本发明授权靶向敲除牛乳腺上皮细胞TARDBP基因的sgRNA及其构建的细胞株在权利要求书中公布了:1.sgRNA靶向敲除牛TARDBP基因的细胞株,或sgRNA表达载体或CRISPRCas9系统或试剂盒或牛乳腺上皮细胞TARDBP基因敲除细胞株的构建方法在调控牛乳腺上皮细胞甘油三酯合成中的应用,所述sgRNA包括sgRNA1或sgRNA2;所述sgRNA1的核苷酸序列如下:GAGATACCATCGGAAGACGA(SEQIDNO.1);所述sgRNA2的核苷酸序列如下:GTCTTCCGATGGTATCTCAA(SEQIDNO.2);所述sgRNA表达载体包括所述的sgRNA1或sgRNA2的DNA序列;所述CRISPRCas9系统包括所述的sgRNA表达载体、包含Cas9的质粒或包括所述的sgRNA和外源cas9蛋白;所述试剂盒包括所述CRISPRCas9系统;所述牛乳腺上皮细胞TARDBP基因敲除细胞株的构建方法包括如下步骤:将所述sgRNA1、sgRNA2或所述sgRNA表达载体或所述CRISPRCas9系统,通过脂质体转入宿主细胞中,然后进行PCR鉴定和单克隆培养;经过PCR及测序鉴定阳性克隆细胞,完成敲除细胞株的构建。
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