恭喜江苏天美健大自然生物工程有限公司郁小宁获国家专利权
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龙图腾网恭喜江苏天美健大自然生物工程有限公司申请的专利一种免疫球蛋白粗提物的纯化方法以及高纯度免疫球蛋白获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115417928B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211227911.9,技术领域涉及:C07K16/04;该发明授权一种免疫球蛋白粗提物的纯化方法以及高纯度免疫球蛋白是由郁小宁;甘露;徐鑫鑫;陈虹霏设计研发完成,并于2022-10-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种免疫球蛋白粗提物的纯化方法以及高纯度免疫球蛋白在说明书摘要公布了:本申请涉及牛乳制品加工技术领域,具体公开了一种免疫球蛋白粗提物的纯化方法以及高纯度免疫球蛋白。本申请选用葡聚糖凝胶柱、聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱、琼脂糖凝胶柱和超敏葡琼凝胶柱对SIgA粗品进行分步纯化,与包括离子交换层析步骤的纯化方法相比,本申请的方法能够减少SIgA的损失,提高牛初乳的利用率,有助于降低纯化SIgA的生产成本。另外,本申请采用的琼脂糖凝胶能够有效去除SIgA粗品中混杂的IgG单体以及IgG二聚体,减少了IgG单体以及IgG二聚体在纯化SIgA中的残留量,有助于降低IgG对SIgA抗菌效果的抑制。
本发明授权一种免疫球蛋白粗提物的纯化方法以及高纯度免疫球蛋白在权利要求书中公布了:1.一种免疫球蛋白粗提物的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将SIgA粗品与缓冲液混合,得到的混合物离心至分层后取上清液,上清液在葡聚糖凝胶柱中经过脱盐后,再使用缓冲液进行洗脱,得到含SIgA的蛋白峰;所述缓冲液为pH值7.0-7.4的PBS缓冲液;(2)将含SIgA的蛋白峰与缓冲液混合,然后使用超滤膜对混合物进行超滤浓缩,得到超滤浓缩液;(3)将超滤浓缩液与盐析液混合,然后在0-4℃静置3-5h后离心,然后加入缓冲液直到沉淀物溶解,得到第一混合液,将第一混合液离心至分层后加入聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱中进行层析,收集并合并得到的第二个蛋白峰,然后将合并后的第二个蛋白峰装入透析袋中,使用缓冲液进行透析后得到透析液;所述盐析液由饱和硫酸铵溶液和氨水混合后得到,所述盐析液的pH值为7.0-7.4;(4)将透析液离心至分层后加入琼脂糖凝胶柱中进行分离,得到穿透峰,将穿透峰合并后再与盐析液混合,得到第二混合液;(5)对第二混合液进行离心,然后将缓冲液与得到的沉淀混合,得到第三混合液,将第三混合液加入超敏葡琼凝胶柱中进行洗脱,收集第二个洗脱峰,得到纯化SIgA;所述SIgA粗品按照如下方法制备:(1)将牛初乳离心之后静置,再去除底部的细胞沉淀物和表面的脂肪层,中间层经过纱布过滤后得到初乳乳清;(2)对初乳乳清进行稀释后,使用盐析液对稀释的初乳乳清进行盐析,盐析结束后经过离心并弃去上清液,得到的沉淀物即为SIgA粗品。
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