恭喜中国计量大学;新疆农垦科学院;浙江省农业科学院管峰获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国计量大学;新疆农垦科学院;浙江省农业科学院申请的专利一种检测绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平的引物对及其应用与甲基化检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116121396B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211096171.X,技术领域涉及:C12Q1/6888;该发明授权一种检测绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平的引物对及其应用与甲基化检测方法是由管峰;胡馨予;石国庆;万鹏程;唐红;代蓉;刘昱成;姜俊芳;蒋永清设计研发完成,并于2022-09-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种检测绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平的引物对及其应用与甲基化检测方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种检测绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平的引物对及其应用与甲基化检测方法,属于基因检测技术领域。本发明涉及一种检测绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平的引物对,所述引物对的序列如SEQIDNO:1~2所示。利用该引物对可以特异的检测得到不同品种羊在KAP8基因启动子区域的DNA甲基化水平。利用该区域的DNA甲基化水平可以判定绵羊羊毛纤维的粗细,为后期绵羊育种选育提供科学依据。
本发明授权一种检测绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平的引物对及其应用与甲基化检测方法在权利要求书中公布了:1.如SEQIDNO:1~2所示的引物对在判断绵羊羊毛粗细程度中的应用,其特征在于,引物对在判断绵羊羊毛粗细程度时,按照下述步骤进行:(1)提取离体绵羊皮肤组织的DNA,对所述的DNA进行甲基化处理,得到经过甲基化处理的待测基因组DNA;(2)以所述经过甲基化处理的待测基因组DNA为模板,利用SEQIDNO:1~2所示的引物对进行PCR扩增,检测PCR扩增的产物,筛选阳性产物进行测序,测序结果进行比对,根据比对结果判断绵羊KAP8基因启动子DNA甲基化水平,从而判断绵羊羊毛粗细程度;所述离体绵羊皮肤组织为绵羊耳部皮肤组织和或肩胛部皮肤组织;所述甲基化处理为亚硫酸氢盐甲基化处理;所述PCR扩增的条件为:94℃预变性4.5~5.5min;94℃变性29~35s,退火58~65℃38~50s,72℃延伸43~60s,34~40个循环;之后72℃保持6.5~7.5min;所述PCR扩增产物的大小为193bp;步骤(2)所述检测为琼脂糖凝胶电泳检测;所述琼脂糖凝胶电泳检测时的琼脂糖的初始浓度为1.5~2.5wt%;所述测序为双向测序或将阳性产物连接至空载载体中测序;所述空载载体为pMD18-T;所述比对为利用Megalign软件进行比对。
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