恭喜青岛海智源生命科技有限公司韩吉薇获国家专利权
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龙图腾网恭喜青岛海智源生命科技有限公司申请的专利一种在裂殖壶菌中实现胡萝卜素和DHA联合生产的方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117821531B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311832677.7,技术领域涉及:C12P7/6434;该发明授权一种在裂殖壶菌中实现胡萝卜素和DHA联合生产的方法和应用是由韩吉薇;矫恒晨设计研发完成,并于2023-12-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种在裂殖壶菌中实现胡萝卜素和DHA联合生产的方法和应用在说明书摘要公布了:本发明属于微生物发酵技术领域,公开了一种裂殖壶菌发酵联合生产DHA和类胡萝卜素的方法,所述方法以裂殖壶菌为生产菌株生产多不饱和脂肪酸和类胡萝卜素,在发酵培养基当中添加NADPH氧化酶抑制剂,同时采取阶段控温的发酵方法。本发明通过在微生物发酵的过程中将阶段性变温发酵和添加NADPH氧化酶抑制剂相结合,能够实现裂殖壶菌发酵过程中DHA和类胡萝卜素的联合生产,从而获得高DHA和类胡萝卜素的微生物油脂。
本发明授权一种在裂殖壶菌中实现胡萝卜素和DHA联合生产的方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种裂殖壶菌发酵联合生产DHA和类胡萝卜素的方法,其特征在于:所述方法以裂殖壶菌为生产菌株生产多不饱和脂肪酸和类胡萝卜素,在发酵培养基当中添加NADPH氧化酶抑制剂,同时采取阶段控温的发酵方法;所述发酵培养基和NADPH氧化酶抑制剂的用量比L:μmol为1:1-50;所述NADPH氧化酶抑制剂为GSK2795039、二苯基氯化碘盐、2,5-二取代苯并噁唑和苯并噻唑化合物中的一种或者几种的组合;所述发酵的过程中采用阶段式控温的方法,即第一阶段:时长36-60h,发酵温度30℃;第二阶段:时长10h,发酵温度25℃;第三阶段:时长50-74h,发酵温度22℃;根据发酵数据的结果适当调整发酵时间,发酵的总时长为120h;其中,所述培养的条件为22~30℃,150~250rmin振摇培养;所述发酵培养基的pH值为6.5~7.5,制成其的原料包括:葡萄糖50~100gL、酵母浸粉6~15gL、硫酸钠6~12gL、硫酸镁1~4gL、硫酸铵3~8gL、氯化钾1~2gL、氯化钙0.1~0.2gL、磷酸二氢钾0.5~2gL、谷氨酸钠15~20gL、七水合硫酸锌1~5mgL、六水合氯化钴0.01~0.1mgL、五水合硫酸铜1~6mgL、六水合硫酸镍1~2mgL、七水合硫酸铁7~15mgL、泛酸钙2~4mgL、四水合氯化锰3~5mgL、二水合钼酸钠0.02~0.06mgL、维生素B64~10mgL和维生素B120.1~0.5mgL;通过使用氨水和柠檬酸来控制pH值;所述发酵用种子液通过如下方法得到:将裂殖壶菌的菌种接种于一级种子培养基当中,培养获得一级种子液;取一级种子液于二级种子培养基当中,培养获得二级种子液;取二级种子液与三级种子培养基当中,培养获得三级种子液;其中,所述培养的条件为25~30℃,150~250rmin振摇培养;所述种子培养基的pH为6.5,且包括:葡萄糖50-80gL、酵母浸粉2-5gL、硫酸钠2-5gL、硫酸镁2-5gL、硫酸铵2-6gL、氯化钾1-6gL、氯化钙0.1-0.4gL、硫酸钾0.2-0.6gL、磷酸二氢钾1-2gL、谷氨酸钠5-10gL、0.1%的微量矿物质、维生素B62-5mgL及维生素B120.2-0.5mgL;其中,微量矿物质为:七水合硫酸锌2mgL,六水合氯化钴0.01mgL,五水合硫酸铜2mgL,六水合硫酸镍1mgL,七水合硫酸铁8mgL,泛酸钙2mgL,四水合氯化锰4mgL,二水合钼酸钠0.04mgL;通过使用氨水和柠檬酸来控制pH值;所述裂殖壶菌为裂殖壶菌Schizochytriumsp.HX-308,其保藏编号为CCTCCNo.M209059,该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,且已在专利号为201510417269.4的中国发明专利公开。
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