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摘要：本发明公开一种粒径可控的荧光聚多巴胺纳米粒子的制备及其用于胰蛋白酶检测。其特征是通过将多巴胺在碱性条件下搅拌自聚合成聚多巴胺纳米颗粒，再加入H2O2，控制时间和温度可将聚多巴胺纳米颗粒分解成粒径小于5nm的荧光聚多巴胺纳米粒子。本发明的制备方法步骤简单，使用绿色环保的源材料，产物粒径可控。本发明的荧光聚多巴胺纳米粒子，其表面富含负电荷，具有良好的荧光性能，与阳离子鱼精蛋白通过静电吸附和氢键作用聚集而猝灭荧光，因胰蛋白酶特异性水解鱼精蛋白，仅通过简单的混合操作，根据聚多巴胺纳米粒子荧光的恢复，实现胰蛋白酶的检测，并且胰蛋白酶的最低检出限可达到6.4ngmL。
主权项：1.一种荧光聚多巴胺纳米粒子检测胰蛋白酶的检测方法，通过荧光分光光度法对加入不同浓度胰蛋白酶前后荧光聚多巴胺纳米粒子PDNPs的荧光进行检测，其特征在于，所述荧光分光光度法中使用的溶液由缓冲溶液、荧光聚多巴胺纳米粒子PDNPs、鱼精蛋白Pro和胰蛋白酶混合而成；所述的荧光聚多巴胺纳米粒子PDNPs由下述方法制备的，其制备步骤如下：将多巴胺DA和三羟甲基氨基甲烷混合搅拌，自聚合成聚多巴胺纳米颗粒，之后加入H2O2和NaOH加热回流，将最终产物用截留分子量为3500Da的透析袋透析便得到荧光聚多巴胺纳米粒子PDNPs；所述三羟甲基氨基甲烷加入HCl调节溶液pH为8.5，搅拌20小时；加入H2O2和NaOH加热回流30min后制得PDNPs；所述的PDNPs最大激发波长为340nm，最大发射波长为435nm；在缓冲溶液、PDNPs、鱼精蛋白和胰蛋白酶溶液中，鱼精蛋白Pro浓度在10~80μgmL范围内，PDNPs、鱼精蛋白和胰蛋白酶的反应时间在0.1~20分钟范围内进行优化。
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百度查询： 福建医科大学 一种粒径可控的荧光聚多巴胺纳米粒子的制备以及胰蛋白酶的检测
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