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摘要：本公开涉及一种用于确定适合于将完整包装遗传物质的腺相关病毒AAV衣壳与不完整包装遗传物质的AAV衣壳分离的洗脱条件的方法，所述方法包括：a将包含AAV衣壳的液体样品添加到强或部分强的阴离子交换色谱材料，所述色谱材料包含表面延伸剂，b通过应用包含递增电导率的阶梯梯度的洗脱缓冲液从色谱材料洗脱AAV病毒衣壳，所述电导率每阶梯增加约0.5至约3mScm，c基于步骤b中获得的洗脱曲线，确定电导率或电导率相关参数的第一值，其适合于洗脱不完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳，以及d基于步骤b中获得的所述洗脱曲线，确定电导率或电导率相关参数的第二值，其适合于洗脱完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳。进一步公开了基于电导率或电导率相关参数的预先确定的第一值和第二值将完整包装的AAV衣壳与不完整包装的AAV衣壳分离的方法，以及阴离子交换色谱材料用于将完整包装的AAV衣壳与不完整包装的AAV衣壳分离的用途。

主权项：1.一种用于确定适合于将完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳与不完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳分离的洗脱条件的方法，所述方法包括以下步骤：a.将包含纯度为至少90％并且浓度为至少1012个腺相关病毒衣壳ml的腺相关病毒衣壳的液体样品添加到强或部分强的阴离子交换色谱材料，所述色谱材料包含支持物和用于与腺相关病毒衣壳结合的配体，其中至少5％的所述腺相关病毒衣壳为完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳，其中所述色谱材料包含将所述配体连接至所述支持物的表面延伸剂，其中所述表面延伸剂是聚合物，其中所述聚合物选自：i具有天然存在的骨架的聚合物，例如多糖，例如淀粉、纤维素、葡聚糖或琼脂糖，和ii具有合成骨架的聚合物，例如聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺或聚乙烯醚；b.通过应用包含递增电导率的阶梯梯度的洗脱缓冲液，从所述色谱材料洗脱不完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳和完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳，所述电导率开始于约0至约5mScm，并且每阶梯增加约0.5至约3mScm，至少达到并包括不完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳和完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳已从所述色谱材料洗脱的电导率；c.基于步骤b中获得的洗脱曲线，确定电导率或电导率相关参数的第一值，其适合于洗脱不完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳，和d.基于步骤b中获得的所述洗脱曲线，确定电导率或电导率相关参数的第二值，其适合于洗脱完整包装遗传物质的腺相关病毒衣壳。

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百度查询： 思拓凡生物工艺研发有限公司 用于分离腺相关病毒衣壳的方法和预筛选方法