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库制备 

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摘要:本公开提供在衔接子接合与PCR扩增之间不需要纯化的DNA库制备方法。将衔接子添加到DNA片段以形成寡核苷酸延伸产物,并且在不停止或中断以进行净化步骤的情况下扩增所述寡核苷酸延伸产物。来自衔接子添加步骤的过量材料如酶、衔接子或辅因子不会干扰扩增步骤并且所述扩增步骤的进行不考虑来自接合步骤的试剂的存在。在优选实施例中,所述接合步骤和扩增步骤利用共同引发序列,例如呈衔接子寡核苷酸中的一个的形式。

主权项:1.一种制备测序库的方法,所述方法包含:从样品获得多个DNA片段;将至少部分双链的衔接子引入所述多个DNA片段;将所述衔接子的第一链接合到所述DNA片段的5'端上以形成衔接子接合片段;以及在过量衔接子的存在下扩增所述衔接子接合片段,而不纯化所述衔接子接合片段,以形成多个扩增子,所述过量衔接子不接合到所述DNA片段中的一个,其中所述第一链包含条形码序列,并且其中扩增所述衔接子接合片段包括使用所述衔接子的所述第一链作为扩增引物。

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