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鸡蛋花苷的对照品的制备方法 

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摘要:本公开提供一种鸡蛋花苷的对照品的制备方法,包括特定的大孔树脂色谱柱提纯工序,以及特定的聚酰胺柱层析工序。通过特定的柱层析之间的结合,能够高通量的获得HPLC纯度高的目标物对照品,本发明鸡蛋花苷的固体对照品的制备方法,可以最大限度的降低有机溶剂的使用,工业生产适用性非常好。

主权项:1.一种鸡蛋花苷的对照品的制备方法,其特征在于,依次包括以下步骤:大孔树脂富集工序,将黄蝉总提取物溶液上样于苯乙烯型非极性大孔吸附树脂柱层析,分别以水、5~15%的乙醇洗脱去除前杂、再用45%~55%的乙醇洗脱,收集45%~55%的乙醇洗脱液的流分,将该流分于55℃以下温度减压浓缩得到黄蝉粗提物I,聚酰胺纯化工序,将黄蝉粗提物I上样于30~70目聚酰胺柱层析,分别以水洗脱3~5倍柱体积的前杂,利用15~25%乙醇水溶液洗脱3~5倍柱体积去除杂质,其中15~25%乙醇水溶液中以体积比计含有0.05~0.1%的甲酸,利用55~65%乙醇洗脱,收集55~65%乙醇洗脱液,利用碳酸二氢钠将洗脱液调节至pH中性,于45℃以下温度减压浓缩得到鸡蛋花苷粗提物I;反相色谱纯化工序,将鸡蛋花苷粗提物上样至反相色谱,用乙腈水溶液或甲醇水溶液的混合洗脱剂,以0.1~1Mpa压力进行洗脱,其中,乙腈与水的比例或甲醇与水以体积比计为0.20~0.65:1,根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液,在45℃以下的温度减压浓缩,去除其中的乙腈或甲醇,得到鸡蛋花苷的对照品溶液I,室温去除水或重结晶得到鸡蛋花苷的对照品。

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