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申请/专利权人:武汉生之源生物科技股份有限公司
摘要:本发明提供了一种PIVKA‑Ⅱ检测试剂盒及其制备方法,所述检测试剂盒包括试剂M和试剂R,所述试剂M包括:稀释液Ⅰ和偶联有生物素化鼠抗人PIVKA‑Ⅱ单克隆抗体的磁珠微粒,所述试剂R包括稀释液Ⅱ和碱性磷酸酶标记的兔抗人PIVKA‑Ⅱ多克隆抗体;偶联有生物素化鼠抗人PIVKA‑Ⅱ单克隆抗体的磁珠微粒的结构具体为:磁珠微粒表面先包被抗SA抗体,然后连接SA,再偶联生物素化鼠抗人PIVKA‑Ⅱ单克隆抗体。该试剂盒具有更高的PIVKA‑Ⅱ检测灵敏度,同时具有更宽的线性范围。
主权项:1.一种PIVKA-Ⅱ检测试剂盒,其特征在于,包括试剂M和试剂R,所述试剂M包括:稀释液Ⅰ和偶联有生物素化鼠抗人PIVKA-Ⅱ单克隆抗体的磁珠微粒,所述试剂R包括稀释液Ⅱ和碱性磷酸酶标记的兔抗人PIVKA-Ⅱ多克隆抗体;其中,偶联有生物素化鼠抗人PIVKA-Ⅱ单克隆抗体的磁珠微粒的结构具体为:磁珠微粒表面先包被抗SA抗体,然后连接SA,再偶联生物素化鼠抗人PIVKA-Ⅱ单克隆抗体;所述磁珠微粒的直径为0.8μm~3μm;所述磁珠微粒与抗SA抗体、SA、生物素化鼠抗人PIVKA-Ⅱ单克隆抗体的质量比为0.3:0.25:0.02:0.5;所述稀释液Ⅰ包括:0.03%~0.1%Proclin300,0.02~0.05molL缓冲液,0.2%~2%表面活性剂,0.1%~0.5%蛋白,pH为7.0~8.0;其中,缓冲液为PB缓冲液、MOPS缓冲液、TES缓冲液、HEPES缓冲液和DIPSO缓冲液中的任意一种,表面活性剂为Brij-35、S9、EmulgenA90和PEG-20000中的任意一种,蛋白为BSA或牛γ球蛋白;所述稀释液Ⅱ包括:0.9%氯化钠、1mM六水合氯化镁、0.1mM无水氯化锌、0.1%牛血清白蛋白、0.05%Proclin300、0.02MpH7.4~8.0的Tris-HCl缓冲液。
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