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申请/专利权人:江苏海洋大学
摘要:本发明公开了一种检测卡那霉素含量的荧光适配体传感器及其制备方法,所述卡那霉素荧光适配体传感器通过将两条分裂适配体作为识别探针,ExoⅠ作为淬灭剂,通过合成DNA‑AgNCs信号探针后制备得到,所述卡那霉素分裂适配体序列如SEQIDNO.1所示,序列SEQIDNO.1具体为:Split‑Apt‑Ⅰ:5’‑TGGGGGTTGAG‑3’;Split‑Apt‑Ⅱ:5’‑GCTAAGCCGA‑3’;本发明首次获得了高灵敏度、高特异性和高稳定性的卡那霉素适配体传感器。
主权项:1.一种检测卡那霉素含量的荧光适配体传感器,其特征在于:所述荧光适配体传感器包括用两条卡那霉素分裂适配体作为识别探针,ExoⅠ作为淬灭剂,通过合成信号探针DNA银纳米簇DNA-AgNCs后检测不同靶标浓度的荧光信号变化,卡那霉素分裂适配体Split-Apt-Ⅰ的互补序列cDNA具体为:CCTCCTTCCTCCCGTACCCCCAA;其制备方法包括以下步骤:S1:Split-Apt-Ⅰ序列与cDNA-AgNCs序列的杂交互补:cDNA-AgNCs序列与Split-Apt-Ⅰ序列混合反应,溶于适量缓冲液中,以形成dsDNA结构;S2:Split-Apt-Ⅰ、Split-Apt-Ⅱ与卡那霉素的识别反应:取Split-Apt-Ⅱ溶于适量缓冲液中,于金属浴中加热,然后转移至上述dsDNA溶液中,同时加入稀释过的卡那霉素溶液共同孵育;S3:ExoⅠ的酶切反应:将适量ExoⅠ加入至前述溶液中进行酶切,反应结束后高温灭酶,再冰浴降温;S4:DNA-AgNCs信号探针的制备:向前述溶液中加入定量的硝酸银AgNO3溶液,振荡混匀后,加入等量硼氢化钠NaBH4溶液触发化学还原反应,振荡摇匀后避光反应即可制得DNA-AgNCs信号探针。
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百度查询: 江苏海洋大学 一种检测卡那霉素含量的荧光适配体传感器及其制备方法
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