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申请/专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
摘要：本发明涉及一种基于生物膜干涉技术的非共价固定多糖检测多糖与蛋白相互作用亲和力的方法。利用非共价结合的方式将多糖吸附固定在氨基丙基硅烷APS传感器表面，再通过生物膜干涉技术检测蛋白与多糖的亲和力。该方法适用于高分子量、带有负电荷的多糖，解决了生物膜干涉技术中多糖不易固定、多糖分子量不均一造成的亲和力难于表征等问题。该方法操作简便，蛋白样品用量小，多糖样品可重复多次利用、可行性高。
主权项：1.一种基于生物膜干涉的多糖与蛋白相互作用亲和力的测定方法，其特征在于：利用氨基丙基硅烷（APS）传感器非共价键吸附固定多糖，检测蛋白与多糖的亲和力，所述的多糖样品为分子量高于5000Da、带有负电荷的各类多糖样品中的一种或二种以上，多糖样品为糖胺聚糖、果胶类多糖、唾液酸化的多糖中的一种或二种以上；具体操作为：1）传感器的预湿：将4个以上APS传感器光纤末端分别浸入水中，用水浸润预湿；2）多糖的离线固定：将4个以上APS传感器光纤末端分别浸入多糖溶液中；3）传感器的封闭：将4个以上APS传感器光纤末端分别浸入1-5%（gmL）BSA的缓冲液的溶液中；4）亲和力检测：于生物膜干涉仪进行；a、将4个以上APS传感器光纤末端分别浸入1-5%BSA（gmL）的缓冲液的溶液，进行基线信号获取；b、将4个以上APS传感器光纤末端分别浸入不同浓度蛋白样品实验组溶液，进行结合信号获取；实验组溶液的制备：将1-5%BSA（gmL）的缓冲液的溶液梯度稀释的3个以上不同浓度蛋白样品，蛋白样品终浓度在0至20μgmL之间，以蛋白样品终浓度为0的1-5%BSA（gmL）缓冲溶液为对照；c、将4个以上APS传感器光纤末端分别浸入1-5%BSA（gmL）的缓冲液的溶液，进行解离信号获取；d、于生物膜干涉仪“DataAnalysis”软件进行拟合计算，获得多糖与蛋白样品的亲和力。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院大连化学物理研究所 一种基于生物膜干涉的多糖与蛋白相互作用亲和力的方法
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