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申请/专利权人:成都医学院第一附属医院;电子科技大学
摘要:本发明属于生物工程技术领域,特别是涉及一种细胞实时迁移率研究方法,包括在ITO电极上刻蚀条状的图形,嵌入细胞培养池中;将条状的图形与电化学工作站三电极系统构成电化学生物迁移传感器;在光学平台上,并通过电脑中安装的活细胞动态监测分析处理软件来进行活细胞的动态观察,加入细胞悬液,培养,细胞附着在ITO电极上形成单层,划出一条直线状的伤口,划线伤口位于ITO电极间隔区域,使细胞层中留下一个空白区域,洗涤去除游离的细胞;培养细胞,同时使用阻抗检测法实时测定电阻信号变化;优化电化学工作站的频率信号,实时采集划痕后的细胞分析覆盖率的数据,实时采集细胞电阻信号变化数据,绘图以实时监测细胞迁移能力变化。
主权项:1.一种细胞实时迁移率研究方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、在ITO电极上刻蚀出至少一个条状的图形;S2、将ITO电极嵌入细胞培养池中;S3、将具有条状的图形的ITO电极与电化学工作站的三电极系统中的工作电极相连,在细胞培养池中插入铂丝并将铂丝与三电极系统中对电极相连,在细胞培养池中插入AgAgCl电极与三电极系统中参比电极相连;构建得到电化学生物迁移传感器;S4、将连接好的电化学生物迁移传感器放置到光学平台上;然后,将整个光学平台放置在细胞培养箱中,通过电脑中安装的活细胞动态监测分析处理软件来接收光学平台的图像传感器的信号;然后使用紫外线照射灭菌,再将含有细胞的悬液加入培养池中,细胞附着在ITO电极上形成单层;S5、在细胞单层中,沿着ITO电极的条状的图形位置划出一条直线状的划痕,使细胞层中留下一个空白区域,用无血清培养基洗涤细胞,去除游离的细胞;加入培养基,进行培养;S6、开始实验,启动活细胞动态监测分析处理软件,观察划痕区域的变化;同时,使用电化学工作站使用阻抗检测法实时测定细胞在ITO电极上贴壁生长所产生的电阻信号变化;S7、通过活细胞动态监测分析处理软件实时采集划痕后的细胞覆盖率的数据,通过电化学工作站实时采集细胞电阻信号变化数据,并以时间为横坐标,细胞覆盖率变化和电阻变化为纵坐标画图,实时监测细胞迁移能力的变化。
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