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申请/专利权人：浙江大学
摘要：本发明公开了一种固相萃取‑氮吹浓缩‑液相色谱串联质谱检测饮用水中二核苷酸的方法，该方法先使用固相萃取富集待测水样中目标物质，然后使用氮吹仪对萃取后样品进行浓缩，最终使用液相色谱串联质谱的多反应监测模式测定二脱氧胞苷酸、二脱氧腺苷酸、二脱氧鸟苷酸和二脱氧胸苷酸的浓度。本发明将固相萃取与氮吹浓缩相结合，最后配合液相色谱串联质谱的检测技术联用，实现了复杂基质条件下痕量二核苷酸的检测。
主权项：1.一种固相萃取-氮吹浓缩-液相色谱串联质谱检测饮用水中二核苷酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：1采集饮用水后加入与水中余氯等物质量的除氯剂，以猝灭饮用水中的余氯，获得待测样本，并将其储存于4℃环境下；2将步骤1获得的待测样本通过孔径为0.45μm的滤纸进行过滤，得到过滤样本；3分别采用6-12mL甲醇和6-18mL纯水活化固相萃取所需的WAX小柱；4将步骤2得到的过滤样本通过WAX小柱进行富集，以将目标物质富集在WAX小柱上，并在真空条件下抽干WAX小柱直至底部变白；5在标准大气压下采用3mL含体积分数为5％的氨水的甲醇洗脱截留在WAX小柱上的目标物质，获得含目标物质的待测样品；6将步骤5获得的含目标物质的待测样品在氮气流下氮吹至0.05mL，再加入0.95mL水，采用涡旋混合，获得混合溶液，用于液相色谱串联质谱检测；7采用乙酸铵二乙胺水溶液和乙酸铵二乙胺乙腈溶液作为液相色谱串联质谱的流动相，其中，乙酸铵二乙胺水溶液中含有体积分数为0.06％二乙胺和物质的量浓度为2mmolL的乙酸铵以及水，乙酸铵二乙胺乙腈溶液中含有体积分数为0.06％二乙胺和物质的量浓度为2mmolL的乙酸铵以及乙腈；采用梯度洗脱20分钟，采用BEHC18的液相色谱柱通过多重反应监测方法分离并定量二核苷酸的浓度来测定饮用水中的二脱氧胞苷酸、二脱氧腺苷酸、二脱氧鸟苷酸和二脱氧胸苷酸的浓度。
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权利要求：
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