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申请/专利权人:湖北工程学院
摘要:本发明公开了一种植物叶片表皮细胞皮层微管结构的可视化方法,包括以下过程:对叶片组织进行固定处理,再将叶片组织放入样品管进行液氮速冻预处理,待叶片组织恢复室温后,用DMSO和NP‑40预处理以增加细胞膜通透性,最后依次用anti‑α‑tubulin、与anti‑α‑tubulin特异结合的含荧光标记的二抗孵育叶片组织,即可观察微管结构。本发明在免疫荧光染色之前,采用液氮以及DMSO、NP‑40预处理固定好的叶片组织,实现了对表皮细胞的皮层微管结构简单、快速且有效地标记,同时所得微管骨架结构完整,为微管骨架与叶片细胞形态建立、生物及非生物胁迫抗性等研究提供一种可靠的观察方法。
主权项:1.一种植物叶片表皮细胞皮层微管结构的可视化方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、对叶片组织进行固定处理;S2、将叶片组织放入样品管中,置于液氮中冷冻50~70s,取出并振动样品管以促使细胞壁产生裂缝,待恢复室温后再次冷冻和动荡,重复2~4次;S3、待叶片组织恢复室温后,用含有DMSO和NP-40的缓冲液浸泡20~40min;S4、依次用anti-α-tubulin、与anti-α-tubulin特异结合的含荧光标记的二抗孵育叶片组织,利用荧光即可观察微管结构。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 湖北工程学院 一种植物叶片表皮细胞皮层微管结构的可视化方法
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