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申请/专利权人:可孚医疗科技股份有限公司
摘要:本发明公开了一种氧化酶的固定方法,包括以下步骤:在氧化酶保护剂溶液中加入氧化酶,制得含保护剂的氧化酶溶液;取高分子载体加入水中,混合混匀,得到高分子载体溶液;在反应容器中依次加入高分子载体溶液、螯合物、含保护剂的氧化酶溶液,进行加热、搅拌,得到固定化的氧化酶。通过本发明方案用于胆固醇氧化酶的保护及固定,在室温下连续40天的时间内酶活性保留率达到96.7%,在50℃的环境下仍有95.9%的酶活性,即使60℃酶活性仍保留75.8%,相比于普通的保护或固定极大提高的酶的实时稳定性和热稳定性,使氧化酶的诊断类产品有效期可以得到有效的改善。
主权项:1.一种氧化酶的固定方法,其特征在于包括以下步骤:在氧化酶保护剂溶液中加入氧化酶,制得含保护剂的氧化酶溶液;取高分子载体加入水中混合混匀,得到高分子载体溶液;在反应容器中依次加入高分子载体溶液、螯合物、含保护剂的氧化酶溶液,进行加热、搅拌,得到固定化的氧化酶;所述氧化酶、所述氧化酶保护剂、所述高分子载体、所述螯合物的质量比为1:10~30:0.1~0.5:10~40;所述螯合物为GHK-Zn螯合物;所述氧化酶保护剂溶液中包括质量比为0.1~1:1~20:0.1~0.5的多元醇、非还原性糖、BSA,还包括pH缓冲液及浓度为10mmolL~100mmolL的金属离子氯化物;所述多元醇为山梨醇;所述非还原性糖为海藻糖、蔗糖和可溶性淀粉中的至少一种;所述pH缓冲液为3-N-吗啉基丙磺酸钠盐(MOPs-Na)缓冲液;所述金属离子氯化物为KCl;所述高分子载体为羟甲基纤维素纳;所述氧化酶为胆固醇氧化酶。
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