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申请/专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要：本发明公开了一种利用LC‑MS和同位素稀释测定法直接测定骨骼肌中的α和γ‑谷氨酰肽的方法。本发明方法包括如下步骤：1使用二硫苏糖醇水溶液配制α‑和γ‑谷氨酰‑半胱氨酰‑甘氨酸的标准储备液和内标储存溶液，其他α‑和γ‑谷氨酰肽标准品溶于去离子水中制成标准储备液，所有标准储备溶液在含内标的去离子水中混合稀释，配制为混合工作溶液；2将新鲜骨骼肌待测样品处理，加入含有内标的提取试剂提取，并稀释得到提取溶液；3将混合工作溶液和提取溶液分别经LC‑MS方法测定，根据提取溶液的液相色谱和质谱数据与混合工作溶液的数据分析，对待测样品进行定量和定性检测。本发明利用LC‑MS方法准确分析骨骼肌中的α‑和γ‑谷氨酰肽，具有高选择性、高灵敏度。
主权项：1.一种利用LC-MS和同位素稀释测定法直接测定骨骼肌中的α和γ-谷氨酰肽的方法，包括如下步骤：1使用二硫苏糖醇水溶液配制α-和γ-谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸的标准储备液和内标γ-谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸谷胱甘肽-13C215N1储存溶液，其他α-和γ-谷氨酰肽标准品溶于去离子水中制成标准储备液，所有α-和γ-谷氨酰肽标准储备溶液在含内标的去离子水中混合稀释，配制为混合工作溶液，备用；2将新鲜骨骼肌待测样品修剪去除不可食用部分，搅碎后保存在-80℃温度下，加入含有内标γ-谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸谷胱甘肽-13C215N1的提取试剂匀质、离心去除沉淀，收集上清液，用含有内标的提取试剂稀释得到提取溶液；3将步骤1中所述的混合工作溶液和步骤2中所述提取溶液分别经LC-MS方法测定，根据所述提取溶液的液相色谱和质谱数据与所述的混合工作溶液的数据分析，对所述待测样品进行定量和定性检测。
全文数据：
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百度查询： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 一种利用LC-MS和同位素稀释测定法直接测定骨骼肌中的α和γ-谷氨酰肽的方法
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