龙图腾网&IPTOP
- 微信扫码登录
- 账号密码登录
- 短信登录/注册
买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！
申请/专利权人：杭州清大科瑞生物科技有限公司
摘要：本发明公开了高效的SD大鼠骨髓间充质干细胞培养、扩增、冻存方法，涉及细胞培养技术领域。本发明包括以下步骤：S1、配置SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖培养基，增殖培养基包含LG‑DMEM培养基、α‑MEM培养基、FBS、青链霉素溶液、L‑谷氨酰胺；S2、腹腔注射500μl水合氯醛，麻醉后处死SPF级3‑4周龄SDWistar大鼠，用75％乙醇浸泡；S3、用剪刀小心剪开大鼠下肢的内、外皮，取出双侧股骨和胫骨，用刀片将股骨和胫骨周围的肌肉、结缔组织剔除干净；并将取出的骨组织用PBS溶液清洗；S4、用剪刀剪去股骨与胫骨的两端骨骺，充分暴露出骨髓腔。本发明提供的培养方法，所得到的骨髓间充质干细胞数量多、活性好，并且本发明组成配方简单，培养效果理想，具有广阔的应用前景。
主权项：1.高效的SD大鼠骨髓间充质干细胞培养、扩增、冻存方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、配置SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖培养基，增殖培养基包含LG-DMEM培养基、α-MEM培养基、FBS、青链霉素溶液、L-谷氨酰胺；S2、腹腔注射500μl水合氯醛，麻醉后处死SPF级3-4周龄SDWistar大鼠，用75％乙醇浸泡；S3、用剪刀小心剪开大鼠下肢的内、外皮，取出双侧股骨和胫骨，用刀片将股骨和胫骨周围的肌肉、结缔组织剔除干净；并将取出的骨组织用PBS溶液清洗；S4、用剪刀剪去股骨与胫骨的两端骨骺，充分暴露出骨髓腔；S5、用注射器吸取增殖培养基反复冲洗骨髓腔至骨髓腔内无骨髓存在，收集到的骨髓用移液枪吹散制备得到骨髓悬液；S6、使用全骨髓贴壁法，将所得的骨髓悬液接种于10CM细胞培养皿中，接种密度为2×105ml；S7、在37℃、5％CO2的恒温培养箱中培养72H后，换液去掉未贴壁的悬浮细胞，加入配置好的增殖培养基，此后每2-3天换液一次，直至细胞密度融合至80％即完成培养；S8、用0.25％胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞后，所配置的冻存液为9％DMSO和91％增殖培养基混合而成，用冻存液重悬消化后的细胞，并将细胞于-80℃液氮冻存；传至P3代即可进行细胞鉴定。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 杭州清大科瑞生物科技有限公司 高效的SD大鼠骨髓间充质干细胞培养、扩增、冻存方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
主营中国专利交易买卖与专利转让许可,高校科技成果推广与科技成果转化,知识产权运营管理与平台开发,科技人才专家库与科技猎头等科技服务
开放平台
担保交易
惠及多方
会员特惠
专属平台
适合多方
数据共享
功能齐全
皖公网安备 34010402703815号