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申请/专利权人：北京化工大学
摘要：一种检测发酵液中己二酸含量的气相色谱方法，属于痕量测定领域。包括步骤：取发酵液进行酸化；乙酸乙酯萃取；衍生化；配置一系列不同浓度的己二酸标准溶液；使用气相色谱仪分别对待测样品溶液和己二酸标准溶液进行检测分析；绘制己二酸标准曲线；根据检测结果计算待测样品中己二酸的浓度。本发明提供的发酵液中己二酸的气相检测方法中，操作方便，检测限低，精确度高，可用于发酵液中己二酸含量的检测。
主权项：1.一种检测发酵液中己二酸含量的气相色谱方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）发酵液离心后取上清液，加入上清液体积10%的HCl溶液进行酸化，混匀；再加入乙酸乙酯，剧烈震荡5min，静置，待分层后，取有机相于试管中，水相再次用乙酸乙酯萃取；合并有机相，30℃下氮气吹干；用乙酸乙酯定容，加入N-甲基-N-三甲基硅烷三氟乙酰胺混匀，50-60℃300rpm下衍生1小时，过0.45μm滤膜，待气相色谱分析；（2）称取己二酸标准品，加入N-甲基-N-三甲基硅烷三氟乙酰胺进行衍生化后，用乙酸乙酯定容后作为质量浓度储备液，然后进一步用乙酸乙酯稀释为具有浓度梯度的标准使用液；（3）利用气相色谱仪对步骤（2）标准使用液和步骤（1）试样处理液进行检测；根据标准使用液的己二酸峰位置对应找到试样处理液中己二酸峰位置，然后测定试样处理液中己二酸峰位置对应的峰面积，采用步骤（2）标准使用液得到对应的己二酸色谱峰面积与其浓度之间的关系，然后将试样处理液己二酸峰位置对应的峰面积与上述关系对照得到浓度；步骤（3）所述利用气相色谱仪对试样处理液进行检测的条件为：色谱柱：DB-1，30m×0.25mm，0.25μm进样口温度：250℃；氮气流量：1.0mLmin；吹扫流量：3.0mLmin；辅助气氢气流量：40.0mLmin；空气流量：400.0mLmin；进样体积：1.0μL；柱温：100℃保持0.2min，以5℃min升温至120℃保持5min，以30℃min升温至180℃保持3.8min，合计15min；检测器：氢火焰离子化检测器；检测器温度：300℃。
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