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申请/专利权人：中南大学湘雅医院
摘要：本发明公开了一种基于CRISPRCas9的人源化多系统萎缩小鼠模型的构建方法和应用。构建方法步骤如下：选用human‑SNCA‑205转录本作为目的基因，在目的基因前插入鼠源Plp1基因启动子序列，得到重组序列；将重组序列插入体外质粒载体，重组质粒验证无误后，纯化并提取重组质粒后作为Donor载体；将Cas9、gRNA和Donor载体通过显微注射至C57BL6JGpt小鼠的受精卵中，获得F0代小鼠；F0代阳性小鼠与野生型小鼠交配获得稳定遗传的F1代小鼠。本发明基于CRISPRCas9技术构建了一种稳定传代的、精准模拟的新型MSA小鼠模型，为后续MSA的深入研究提供有力工具。
主权项：1.一种基于CRISPRCas9的人源化多系统萎缩小鼠模型的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.重组序列的合成：选用human-SNCA-205转录本作为目的基因，在目的基因前插入鼠源Plp1基因启动子序列，得到重组序列；S2.体外载体构建与鉴定：将重组序列插入体外质粒载体，重组质粒验证无误后，纯化并提取重组质粒后作为Donor载体；S3.F0代首建鼠的获得：将Cas9、gRNA和Donor载体通过显微注射至C57BL6JGpt小鼠的受精卵中，从而获得F0代小鼠；S4.F1及后代阳性小鼠的获得：F0代阳性小鼠与野生型小鼠交配获得稳定遗传的F1代小鼠。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中南大学湘雅医院 基于CRISPR/Cas9的人源化多系统萎缩小鼠模型的构建方法和应用
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