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一种用于鉴别抗体检测生物学假阳性的方法 

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申请/专利权人:中山大学附属第八医院(深圳福田)

摘要:本发明属于抗原抗体检测技术领域,具体涉及一种用于鉴别抗体检测生物学假阳性的方法,为设计一套解决临床样本生物学假阳性,即非特异性反应的变性基因工程抗原免疫技术,本发明公开了一种用于鉴别抗体检测生物学假阳性的方法,将多种变性抗原和非变性抗原同时成对线性或点状包被在载体上,然后通过免疫实验检测相应的特异性抗体,即可用于鉴别抗体的生物学假阳性。本发明方法可同时用于鉴别多种抗原的非特异性反应,并可检测特异性抗体的免疫反应,避免生物学假阳性对临床血清学检测的影响,具有重要的临床应用价值。

主权项:1.一种非诊断目的的用于鉴别抗体检测生物学假阳性的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将多种抗原分别溶解于含有蛋白质二硫键还原剂的变性缓冲液中,经过100℃高温水浴3-5分钟后离心收集上清,制备得到处理抗原;再将相同的抗原分别溶解于不含蛋白质二硫键还原剂的缓冲液中,经过离心后收集上清,制备得到非处理抗原;所述含有蛋白质二硫键还原剂的变性缓冲液和不含蛋白质二硫键还原剂的缓冲液中,所采用的缓冲液均为PH8.0,且浓度为0.025M的Tris-HCl缓冲液;所述蛋白质二硫键还原剂在变性缓冲液中的浓度为0.1%;各抗原在含有蛋白质二硫键还原剂的变性缓冲液和不含蛋白质二硫键还原剂的缓冲液中的终浓度均为0.5-1.0mgmL;S2、将步骤S1的抗原上清按照相同种类以处理抗原和非处理抗原成对线性或点状包被在固相载体上,制备包被抗原的固相载体;S3、包被抗原的固相载体经过1%脱脂奶粉封闭后,剪裁成抗原检测条;S4、用免疫印迹工作液浸湿抗原检测条后,加入待测抗体样本,经孵育、洗涤、加酶标二抗、洗涤、显色后观察结果;S5、结果判读:非处理抗原和处理抗原均阳性,说明样本中有针对包被抗原的特异性抗体存在;非处理抗原阳性,处理抗原阴性,说明样本中有针对包被抗原的非特异性抗体存在,即存在生物学假阳性;非处理抗原和处理抗原均阴性,说明样本中没有针对该包被抗原的特异性抗体存在。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中山大学附属第八医院(深圳福田) 一种用于鉴别抗体检测生物学假阳性的方法

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