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申请/专利权人:西华师范大学
摘要:本发明公开了一株枯草芽孢杆菌XH‑2及其在防治小麦赤霉病中的应用,其生物菌分离与筛选方法为:选取健康小麦周围5~15cm的土壤于无菌水中搅拌混匀,静置20min后吸取上清液100μl涂布于PDA培养基上,30℃培养1~2d,挑取形态各异的菌落划线纯化培养,将纯化后的单菌落连续纯化培养3次后保存备用。挑取纯化的细菌接种与PH‑1菌株进行对峙培养,本发明涉及生防菌农作物治理技术领域。该枯草芽孢杆菌XH‑2及其在防治小麦赤霉病中的应用,XH‑2可作为赤霉病防治的有效生防菌资源,且具有一定的广谱性。不仅对农作物真菌病害有防治作用,还对药用植物如半夏的真菌病害有良好的防治效果。又不影响作物的正常生长过程。
主权项:1.一株枯草芽孢杆菌XH-2及其在防治小麦赤霉病中的应用,其特征在于,其生物菌分离与筛选方法为:选取健康小麦周围5~15cm的土壤于无菌水中搅拌混匀,静置20min后吸取上清液100μl涂布于PDA培养基上,30℃培养1~2d,挑取形态各异的菌落划线纯化培养,将纯化后的单菌落连续纯化培养3次后保存备用。挑取纯化的细菌接种与PH-1菌株进行对峙培养;所述发酵液和孢悬液的制备方法为:发酵液的制备:挑取XH-2菌株于3ml的PDB培养基中28℃,180rpm摇培8~12h作为种子液,按1∶100种子液:培养基的比例取种子液到新的PDB培养基中摇培24h,随后将摇培24h后的菌液12000rpm离心10min,取上清液用细菌滤器过滤除菌,滤液即为发酵液,将发酵液稀释成1×、10×、100×后用于后续各实验;PH-1孢悬液:用无菌黄色枪头戳取4个PH-1菌块置于50ml的CMC产孢培养基中,28℃,180rpm摇培3~5d后用无菌滤布过滤,将滤液8000rpm离心10min后用无菌ddH2O重悬,用细胞计数板测量孢子浓度,调整孢子浓度为1×106个ml,后续侵染实验将孢悬液与发酵液按1∶1的比例体积比混合后接菌,使孢子终浓度为5×105个ml;Guy11孢悬液的制备:蒋Guy11接种于CM平板,于25℃培养10d后,用无菌ddH2O洗下分生孢子,8000rpm离心3min后去上清,用无菌ddH2O重悬,用细胞计数板测量孢子浓度,调整孢子浓度为5×105个ml。后续侵染实验将孢悬液与发酵液按1∶1的比例体积比混合后接菌,使孢子终浓度为2.5×105个ml;NC-1孢子悬浮液的制备方法同Guy11孢子制备方法。
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