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申请/专利权人:中国农业科学院植物保护研究所
摘要:本发明公开了一种芜菁花叶病毒P1蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用,通过在TuMV侵染性克隆pCambia2300‑TuMVP1的N端插入Flag‑4×Myc标签和青色荧光蛋白CFP标签,使其能表达出具有标签的Flag‑4×Myc‑P1蛋白和青色荧光的CFP‑P1蛋白。本发明方法构建的重组载体pCambia2300‑TuMV‑Flag‑4×Myc‑P1和pCambia2300‑TuMV‑CFP‑P1具有以下优势:1插入标签的TuMV仍能系统侵染;2融合的青色荧光CFP标签可以更清楚的观察在病毒侵染下的P1的真实的亚细胞定位以及P1与融合荧光标签的寄主因子在植物细胞中的共同定位;3鉴于P1是TuMV重要的功能蛋白,融合标签表达后的蛋白可利用标签抗体进行免疫共沉淀,筛选出与P1互作的寄主蛋白。
主权项:1.一种芜菁花叶病毒P1蛋白上插入标签的方法,其特征在于:将青色荧光蛋白CFP标签序列插入到pCambia2300-TuMVP1蛋白的N端,命名为pCambia2300-TuMV:CFP-P1。
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权利要求:
百度查询: 中国农业科学院植物保护研究所 一种芜菁花叶病毒P1蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用
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