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申请/专利权人:艾美探索者生命科学研发有限公司
摘要:本发明公开了一种肺炎球菌多糖结合疫苗各型结合原液吸附率测定方法,包括以下步骤:对供试品进行处理,得到目标样A;对酶标板进行包被以及封闭处理;将稀释后的供试品以及目标样A分别加入到被包被以及封闭处理的酶标板中,得到供试品测试样和目标样A测试样;供试品测试样和目标样A测试样中均加入特异性抗血清,得到供试品反应样和目标样A反应样;向供试品反应样和目标样A反应样中分别加入酶标抗体,然后加入底物液进行显色反应,并测出OD值;以及根据供试品反应样和目标样A反应样中得到的OD值计算出对应的多糖含量,从而计算出吸附率,本发明具有计算出疫苗中各个血清型的结合原液的吸附率,并通过吸附率得出各型结合原液免疫原性的优点。
主权项:1.一种肺炎球菌多糖结合疫苗各个血清型的结合原液吸附率测定方法,其特征在于,包括以下步骤:将供试品稀释后均分成两份,取其中一份供试品进行离心处理,离心后的上层清液,即为目标样A;对酶标板进行包被以及封闭处理;对另一份稀释后的供试品以及目标样A分别加入到被包被以及封闭处理的酶标板中,并在36.9~37℃的温度下孵育1~2h后,得到供试品测试样和目标样A测试样;供试品测试样和目标样A测试样中均加入特异性抗血清,得到供试品反应样和目标样A反应样;向供试品反应样和目标样A反应样中分别加入酶标抗体,孵育,然后加入底物液进行显色反应,并测出OD值;根据供试品反应样和目标样A反应样中得到的OD值计算出对应的多糖含量,并根据供试品反应样和目标样A反应样的多糖含量计算出吸附率;其中,所述吸附率的计算公式为: H为吸附率;YS为目标样A;Y为离心前供试品;其中,对所述酶标板的包被过程包括:将被包被液稀释过的破伤风抗毒素加入至酶标板中,然后在2~8℃的条件下包被16~18h,再使用洗涤缓冲液洗涤酶标板1~2次;对酶标板的封闭处理过程包括:向包被处理过的酶标板中加入封闭液,然后在温度为36.9~37℃条件下放置1~2h,再用洗涤缓冲液洗涤酶标板3~4次。
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