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申请/专利权人：浙江省血液中心

摘要：本发明提供了一种用于HLA基因多重扩增的引物组合物、应用和基因分型方法。该引物组合物包含核苷酸序列如SEQIDNO.1~22的引物，能够对HLA‑A、HLA‑B、HLA‑C、HLA‑DRB1、HLA‑DRB3、HLA‑DRB4、HLA‑DQA1、HLA‑DQB1、HLA‑DPA1和HLA‑DPB1的5'‑UTR至3'‑UTR进行全长扩增，对HLA‑DRB5基因座位进行Intron1至3'‑UTR扩增，提高了后续对HLA基因分型的准确率和基因扩增效率。该HLA基因分型方法利用上述引物组合物对目的基因进行扩增，采用纳米孔测序技术对扩增产物进行测序，有效缓解了HLA基因分型模棱两可问题。

主权项：1.用于HLA基因多重扩增的引物组合物，其特征在于，包括第一引物组、第二引物组、第三引物组和第四引物组；所述第一引物组包括HLA-A位点引物对和HLA-C位点引物对；所述HLA-A位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的上游引物HLA-AF1和核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的下游引物HLA-AR1；所述HLA-C位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.5所示的上游引物HLA-CF和核苷酸序列如SEQIDNO.6所示的下游引物HLA-CR；所述第二引物组包括HLA-B位点引物对、HLA-DRB5位点引物对、HLA-DQA1位点引物对和HLA-DQB1位点引物对；所述HLA-B位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的上游引物HLA-BF1和核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的下游引物HLA-BR1；所述HLA-DRB5位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.13所示的上游引物HLA-DRB5F1-2和核苷酸序列如SEQIDNO.14所示的下游引物HLA-DRB5R1-2；所述HLA-DQA1位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.19所示的上游引物HLA-DQA1F1和核苷酸序列如SEQIDNO.20所示的下游引物HLA-DQA1R1；所述HLA-DQB1位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.15所示的上游引物HLA-DQB1F-2和核苷酸序列如SEQIDNO.16所示的下游引物HLA-DQB1R-2；所述第三引物组包括HLA-DRB1位点引物对和HLA-DRB3位点引物对；所述HLA-DRB1位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.7所示的上游引物HLA-DRB1F-2和核苷酸序列如SEQIDNO.8所示的下游引物HLA-DRB1R-2；所述HLA-DRB3位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.9所示的上游引物HLA-DRB3F和核苷酸序列如SEQIDNO.10所示的下游引物HLA-DRB3R；所述第四引物组包括HLA-DRB4位点引物对、HLA-DPA1位点引物对和HLA-DPB1位点引物对；所述HLA-DRB4位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.11所示的上游引物HLA-DRB4F-2和核苷酸序列如SEQIDNO.12所示的下游引物HLA-DRB4R-2；所述HLA-DPA1位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.21所示的上游引物HLA-DPA1F2和核苷酸序列如SEQIDNO.22所示的下游引物HLA-DPA1R2；所述HLA-DPB1位点引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.17所示的上游引物HLA-DPB1F和核苷酸序列如SEQIDNO.18所示的下游引物HLA-DPB1R。

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权利要求：

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