买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：沈阳化工大学

摘要：本发明公开了王不留行环肽类与黄酮苷及其组合物防治植物病毒病害方法，涉及天然生物防治植物病毒害方法，该方法将3种化合物采用生物物质分离和波谱学技术，结合抗烟草花叶病毒病tobaccomosaicvirus，TMV活性示踪方法，对王不留行种子中抗TMV的天然活性成分进行系统分离而得。发现了王不留行环肽A和王不留行环肽B分别与王不留行黄酮苷抗TMV的互作规律，将其按照一定比例组合，加工成水剂，用于防治烟草花叶病毒病、番茄斑萎病毒病Tomatospottedwiltvirus，TSWV和马铃薯Y病毒病PotatovirusY，PVY等常见植物病毒病害。本发明3种化合物及其组合物具有高效、低毒、不易产生抗药性和环境友好等优势，为防治植物病毒病害的新药创制提出了新途径、新方法。该产品具有广阔的应用前景。

主权项：1.王不留行环肽类与黄酮苷并组合物防治植物病毒害方法，其特征在于，所述方法包括以下过程：1制备王不留行环肽A、王不留行环肽B和王不留行黄酮苷组合物；王不留行环肽A、王不留行环肽B和王不留行黄酮苷是对王不留行种子中抗TMV的天然成分进行系统分离而得：具体过程如下：将王不留行种子粉碎后，用85％的乙醇，在室温、种子粉末与乙醇的固液比为1:5g:mL的条件下，浸提3次，每次2.5小时；3次浸提液合并后，经200目滤网过滤，将所得滤液在40℃条件下进行减压浓缩成浸膏；将王不留行种子醇提取浸膏与蒸馏水按照体积比1：1混合悬浮，依次经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别获得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；上述萃取物对TMV的体外钝化和复制增殖抑制率从大到小依次为乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、石油醚萃取物；将乙酸乙酯部位的浸膏用甲醇溶解，经硅胶柱300～400目柱层析，用氯仿-甲醇1:0、24:1、9:1、5:1、3:1、0:1梯度洗脱，流速为2mLmin，每50mL的洗脱液为1个流份，并通过薄层层析进行检验，将具有相同Rf值的流份合并，最终得到了A、B、C、D、E、F六个馏分；上述馏分对TMV的体外钝化抑制率从大到小依次为F、B、C、A、E、D；复制增殖抑制率从大到小依次为F、C、B、D、A、E；B流份为氯仿-甲醇24:1洗脱物，经硅胶柱300-400目，用氯仿-甲醇体积比15:1洗脱，洗脱液的流速控制在2mLmin，每收集10mL的洗脱液作为一个流份，经反复纯化得到化合物1；化合物1，白色粉末甲醇，ESI-MS给出分子离子峰[M+H]+为mz：610；IR谱在3337.49和1667.38cm-1处的红外吸收归属于氨基和酰胺羰基；通过1H-NMR400MHz和13C-NMR400MHz检测，经与文献比对，确定该化合物为王不留行环肽A，分子式为C31H43N7O6，分子结构式见如下化合物1分子结构式； C流份氯仿-甲醇9:1洗脱物，经硅胶柱300-400目，用氯仿-甲醇体积比20:1、15:1、10:1、5:1进行梯度洗脱，洗脱的流速控制在2mLmin，每收集10mL的洗脱液作为一个流份，流份1-37为氯仿-甲醇20:1洗脱物，经反复纯化得到化合物2；化合物2，白色粉末甲醇，ESI-MS给出分子离子峰[M+H]+为mz：485.23；IR谱在3325.08和1644.13cm-1处有较强的红外吸收，分别对应于氨基和酰胺羰基；通过1H-NMR400MHZ和13C-NMR400MHZ检测，经与文献比对，确定该化合物为王不留行环肽B，分子式为C24H32N6O5，分子结构式见如下化合物2分子结构式； F流份为甲醇洗脱物，经硅胶柱300-400目，用氯仿-甲醇3:1洗脱，加0.1％的水，洗脱液的流速控制在2mLmin，每收集10mL的洗脱液作为一个流份，经反复纯化得到化合物3；化合物3，黄色晶体乙醇，ESI-MS给出分子离子峰[M+H]+为mz：727.20；IR谱在3384.48cm-1有羟基缔合形成宽而强的吸收峰，说明有大量的酚羟基或糖上的羟基存在；1607.77～1654.31cm-1区域内有芳香环双键振动；1072.65～1180.53cm-1区域有强吸收，说明有糖基与黄酮骨架之间连接带来的特征振动；通过1H-NMR400MHZ和13C-NMR400MHZ检测，经与文献比对，确定该化合物为王不留行黄酮苷，分子式为C32H38O19，分子结构式见如下化合物3分子结构式； 2上述组合物制备成水剂防治植物病毒病害制剂1王不留行环肽A与王不留行黄酮苷进行组合，质量组合比为1：60～1：1；制成水剂防治植物病毒病害制剂；用于防治烟草花叶病毒病TMV、番茄斑萎病毒病TSWV和马铃薯Y病毒病PVY常见植物病毒病害；2王不留行环肽B与王不留行黄酮苷进行组合，质量组合比为1：60～1：1；制成水剂防治植物病毒病害制剂；用于防治烟草花叶病毒病TMV、番茄斑萎病毒病TSWV和马铃薯Y病毒病PVY常见植物病毒病害。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 沈阳化工大学 王不留行环肽类与黄酮苷并组合物防治植物病毒害方法