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申请/专利权人：山东省饲料兽药质量检验中心

摘要：本发明公开了一种银黄二陈合剂中多种活性成分同时测定方法，属于兽药中有效成分检测领域，包括如下步骤：制备含有各标准品的混合对照储备溶液；采用萃取剂对银黄二陈合剂样品进行超声萃取，离心、过滤，得提取液；采用超高效液相色谱法对多种活性成分同时进行检测；色谱柱为WATERSUPLCHSST3色谱柱；流动相A为乙腈+0.05％磷酸，流动相B为0.05％磷酸水溶液，并对梯度洗脱程序进行了摸索。通过光谱图、保留时间、色谱峰面积等各项参数进行定性或定量检测，方法简便快速、分离效果好，测定精度高，结果重现性好，易于观察，专属性强，色谱峰峰形良好，既达到中国兽药典的要求，又节省时间、试剂。

主权项：1.一种银黄二陈合剂中多种活性成分同时测定方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）分别称取多种活性成分的标准品并用有机溶剂配置成同时含有各标准品的混合对照储备溶液；（2）采用萃取剂对银黄二陈合剂进行超声萃取，离心、过滤后得待测液；（3）采用超高效液相色谱仪分别对混合对照储备溶液和待测液进行检测，通过色谱图、保留时间对待测液中的多种活性成分进行定性分析，通过色谱峰面积计算出待测液中多种活性成分的含量；所述多种活性成分为：新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、菊苣酸、甘草苷、甘草酸、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和橙皮苷；色谱条件为：流动相A为乙腈+0.05%磷酸，流动相B为0.05%磷酸水溶液，柱温为38-42℃；流动相的流速：0.35mLmin；进样量：1-2μL；色谱柱为watersUPLCHSST3色谱柱；检测条件：PDA检测器，检测波长为238nm；所述萃取剂为50%乙醇；梯度洗脱程序为0-8min，流动相A的体积分数维持在5%；8-12min，流动相A的体积分数由5%变为8%；12-15min，流动相A的体积分数由8%变为12%；15-18min，流动相A的体积分维持在12%；18-20min，流动相A的体积分数由12%变为18%；20-25min，流动相A的体积分维持在18%；25-30min，流动相A的体积分数由18%变为25%；30-40min，流动相A的体积分数维持在25%；40-42min，流动相A的体积分数由25%变为35%；42-46min，流动相A的体积分数由35%变为40%；46-52min，流动相A的体积分数维持在40%；52-53min，流动相A的体积分数由40%变为5%；53-55min，流动相A的体积分数维持在5%。

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