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通过以限定的组织形式靶向整合多个表达盒来产生表达FcRn的细胞的方法 

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摘要:本文报道了用于生产C末端生物素化FcRn的方法,其包括以下步骤:在含生物素的培养基中培养包含编码FcRn和大肠杆菌生物素‑[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶BirA的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞,以及从细胞或培养基回收C末端生物素化FcRn,其中编码FcRn和大肠杆菌BirA的脱氧核糖核酸稳定整合到哺乳动物细胞的基因组中并在5’至3’方向上包含:编码在C末端包含HisAvi标签的I类主要组织相容性复合物样蛋白质α‑FcRn的第一表达盒;编码β2‑微球蛋白β2m的第二表达盒;编码在C末端包含HisAvi标签的I类主要组织相容性复合物样蛋白质α‑FcRn的第三表达盒;编码β2‑微球蛋白β2m的第四表达盒;和编码大肠杆菌生物素‑[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶的第五表达盒。

主权项:1.一种用于生产C末端生物素化FcRn的方法,所述方法包括以下步骤:a在含有生物素的培养基中培养包含编码FcRn和生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶BirA的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞,以及b从所述细胞或所述培养基中回收C末端生物素化FcRn,其中所述编码FcRn和BirA的脱氧核糖核酸稳定地整合到所述哺乳动物细胞的基因组中并且在5’至3’方向上包含-编码在C末端包含Avi标签的I类主要组织相容性复合物样蛋白质α-FcRn的第一表达盒,-编码β2-微球蛋白β2m的第二表达盒,-编码在C末端包含Avi标签的I类主要组织相容性复合物样蛋白质α-FcRn的第三表达盒,-编码β2-微球蛋白β2m的第四表达盒,以及-编码生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶的第五表达盒。

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