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申请/专利权人：华中农业大学;武汉市农业科学院;新疆尉华现代种业科技有限公司
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种基于cDNA酵母文库筛选植物抗非生物胁迫基因的方法。本发明将待测植物的cDNA转化到酵母细胞中构建cDNA酵母文库；将活化处理后的酵母文库菌液涂布到筛选培养基中培养，进行非生物胁迫处理，得到在筛选培养基上存活的的酵母菌落；对外源cDNA进行测序，得到待测植物的抗非生物胁迫基因。本发明通过将cDNA酵母文库进行适宜时间的活化，能够保证酵母的活性，并防止因酵母繁殖导致的重复筛选和筛选效率降低；通过适宜的涂布酵母细胞量，能够避免酵母细胞的种内竞争，提高筛选效率；利用本发明方法能够简单、高效地筛选获得植物抗非生物胁迫基因。
主权项：1.一种基于cDNA酵母文库筛选植物抗非生物胁迫基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：将待测植物的cDNA转化到酵母细胞中构建cDNA酵母文库；将所述cDNA酵母文库进行活化处理，得到活化后的cDNA酵母文库菌液；将所述活化后的酵母文库菌液涂布到筛选培养基中培养，进行非生物胁迫处理，得到在筛选培养基上存活的的酵母菌落；将所述在筛选培养基上存活的酵母菌落中的待测植物的cDNA进行测序，得到待测植物的抗非生物胁迫基因；所述活化的时间为0～15min；以筛选培养基的涂布面积计，所述涂布的酵母细胞量为2.72×106～3.40×106cellscm2；所述筛选培养基包括营养缺陷型SD培养基；所述非生物胁迫包括高温、低温、高盐、高碱和干旱中的一种或多种。
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权利要求：
百度查询： 华中农业大学 武汉市农业科学院 新疆尉华现代种业科技有限公司 一种基于cDNA酵母文库筛选植物抗非生物胁迫基因的方法
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