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一种基于RT-RPA-CRISPR/Cas13a体系快速检测轮状病毒的试剂盒及应用 

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申请/专利权人:浙江大学

摘要:本发明涉及分子生物学技术领域,具体是一种基于RT‑RPA等温扩增结合CRISPRCas13a蛋白快速检测轮状病毒的试剂盒,包括制备Cas13a蛋白,设计并合成适合RT‑RPA扩增的引物,设计并合成适合Cas13a蛋白的crRNA,设计并合成RNA报告分子,设计并合成阳性质粒,制备阳性质粒,配制扩增检测体系和CRISPRCas13a蛋白检测体系。本发明可以通过一步法快速准确地鉴定轮状病毒RNA,操作简便,无需通过变温仪器先实现模版扩增再进行检测,只需在37℃下同时进行等温扩增和CRISPRCas13a蛋白检测反应即可完成检测。本发明所提供的检测方法灵敏度高、特异性好,适用于轮状病毒的检测。

主权项:1.一种基于RT-RPA-CRISPR-Cas13a体系快速检测轮状病毒的试剂盒及应用,其特征在于:包括如下步骤:步骤1制备Cas13a蛋白;步骤2设计并合成阳性质粒;步骤3制备阳性质粒步骤4设计并合成适合Casl3a蛋白的crRNA;步骤5设计并合成RNA报告分子;步骤6设计并筛选适合RT-RPA扩增的引物;步骤7配制扩增检测体系;步骤8检测。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江大学 一种基于RT-RPA-CRISPR/Cas13a体系快速检测轮状病毒的试剂盒及应用

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