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申请/专利权人：东南大学

摘要：本发明公开了一种用于细胞杀伤及出泡的纳米试剂、细胞微米囊泡及其制备方法和应用。该纳米试剂由透明质酸、第四代聚酰胺‑胺树枝状高分子、阿霉素和酪氨酸激酶抑制剂组成。该纳米试剂可实现高效的细胞核药物递送、诱导细胞凋亡并使各类细胞转化为微米级的囊泡，转化率达100％，重点实现了无需外场刺激即可高效诱导细胞产生均一且稳定的微米囊泡，经小鼠体内静脉注射后，该试剂可实现高效的肿瘤富集。另外，本发明还证明了该试剂诱导肿瘤细胞形成的细胞微米囊泡具有良好的免疫刺激效果，可以激活免疫系统进行肿瘤杀伤。由于该试剂具有良好的安全性，并能普适性地诱导各类细胞形成微米囊泡，有望成为一种新型的免疫刺激材料。

主权项：1.一种纳米试剂在制备无需外场刺激诱导细胞出泡的试剂或者药物中的应用，所述细胞为乳腺癌细胞或者黑色素瘤细胞，所述纳米试剂由透明质酸、第四代聚酰胺-胺树枝状高分子、阿霉素和酪氨酸激酶抑制剂组成；所述透明质酸、第四代聚酰胺-胺树枝状高分子、阿霉素和酪氨酸激酶抑制剂的质量比为5-20：10-30：2：1；所述酪氨酸激酶抑制剂为阿帕替尼、拉帕替尼、索拉非尼或达沙替尼中的一种；所述纳米试剂的制备方法，包括以下步骤：（1）向盐酸阿霉素的甲醇溶液中加入三乙胺，得到阿霉素的甲醇溶液；（2）将第四代聚酰胺-胺树枝状高分子、阿霉素和酪氨酸激酶抑制剂阿帕替尼三种组分共溶于甲醇，并混合均匀；（3）将混合溶液用氮气吹干；（4）向步骤（3）干燥过的混合物中加入去离子水进行水化，涡旋形成纳米颗粒；（5）将步骤（4）中得到的纳米颗粒离心去除沉淀得到纳米颗粒悬浮液；（6）一边涡旋，一边向步骤（5）中得到的纳米颗粒悬浮液中加入透明质酸，形成所述纳米试剂；（7）将步骤（5）中得到的纳米试剂透析除去未结合的透明质酸；或者：（8）向盐酸阿霉素的二甲基亚砜溶液中加入三乙胺，得到阿霉素的二甲基亚砜溶液；（9）将阿霉素和酪氨酸激酶抑制剂拉帕替尼或索拉非尼或达沙替尼两种组分共溶于二甲基亚砜，并混合均匀；（10）将混合溶液滴入到第四代聚酰胺-胺树枝状高分子的水溶液中，涡旋形成纳米颗粒；（11）将步骤（10）中得到的纳米颗粒离心去除沉淀得到纳米颗粒悬浮液；（12）一边涡旋，一边向步骤（11）中得到的纳米颗粒悬浮液中加入透明质酸，形成所述纳米试剂；（13）将步骤（12）中得到的纳米试剂在透析除去未结合的透明质酸。

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百度查询： 东南大学 用于细胞杀伤及出泡的纳米试剂、细胞微米囊泡及其制备方法和应用