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申请/专利权人：山西中医药大学
摘要：本发明属于医学实验模型研究技术领域，针对目前自身免疫性肝炎的严重性以及细胞模型对自身免疫性肝炎研究的重要性，公开了一种用于研究自身免疫性肝炎的细胞模型的建立方法。通过采用刀豆蛋白A诱导小鼠巨噬细胞样细胞系RAW264.7巨噬细胞株，并将RAW264.7巨噬细胞株与BRL3a小鼠肝细胞共培养，在体外模拟自身免疫性肝炎发病过程中巨噬细胞对肝细胞造成炎性损伤的过程，建立了巨噬细胞肝细胞共培养模型。弥补了自身免疫性肝炎细胞模型研究的空白，将自身免疫性肝炎的发病过程进行分解，聚焦巨噬细胞诱导肝细胞损伤的机制，有助于自身免疫性肝炎发病机制研究，以及治疗药物的筛选。
主权项：1.一种用于研究自身免疫性肝炎的细胞模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，刀豆蛋白A通过巨噬细胞表面的甘露糖受体结合，实现巨噬细胞的诱导活化，其具体过程为：24孔板按照每孔1×106个RAW264.7巨噬细胞进行细胞接种，每孔加入800μL高糖DMEM培养基后，分别加入0-320μgmL的异硫氰酸荧光素标记的刀豆蛋白A在37℃下诱导巨噬细胞0-24h；步骤2，建立巨噬细胞和肝细胞共培养模型，巨噬细胞和肝细胞共培养模型包括巨噬细胞和肝细胞间接共培养细胞模型，所述巨噬细胞和肝细胞间接共培养细胞模型建立的具体方法为：将RAW264.7巨噬细胞以2×105的密度接种到LABSELECTTranswell小室的上室，BRL3a肝细胞以2×105的密度接种到Transwell小室的下室，然后将Transwell小室在37℃和5%CO2孵箱孵育过夜或孵育12h，将160μgmL的异硫氰酸荧光素标记的刀豆蛋白A加入Transwell小室的上室，诱导RAW264.7巨噬细胞12h。
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百度查询： 山西中医药大学 一种用于研究自身免疫性肝炎的细胞模型的建立方法
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