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申请/专利权人：江南大学
摘要：本发明涉及一种谷氨酸棒杆菌基因组进化的系统、连续进化方法及应用。基于DNA解旋酶在转录过程中解旋dsDNA，将胞嘧啶脱氨酶pmCDA1与DNA解旋酶融合，提高谷氨酸棒杆菌的基因组突变率。应用本发明的连续进化方法提高谷氨酸棒杆菌的乙醇耐受性，获得在13％乙醇浓度下生物量提高10.17倍的突变株。通过全基因组测序鉴定出编码醛脱氢酶的Cgl2467基因的L213W突变对谷氨酸棒杆菌乙醇耐受性提高具有重要作用，并首次鉴定了Cgl2467具有乙醛脱氢酶活性。本发明公开的连续进化方法对筛选其他鲁棒性增强的突变体具有重要指导意义，本发明鉴定的乙醛脱氢酶有助于对谷氨酸棒杆菌乙醇代谢有新的认识。
主权项：1.一种谷氨酸棒杆菌基因组进化的系统，其特征在于，包括质粒载体骨架，所述质粒载体骨架上组装连接有胞嘧啶脱氨酶的核苷酸序列和谷氨酸棒杆菌DNA解旋酶的核苷酸序列；所述胞嘧啶脱氨酶的核苷酸序列和谷氨酸棒杆菌DNA解旋酶的核苷酸序列之间通过柔性linker的核苷酸序列连接；所述胞嘧啶脱氨酶来源于七鳃鳗；所述胞嘧啶脱氨酶的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述柔性linker的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，氨基酸序列如SEQIDNO.6所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一种谷氨酸棒杆菌基因组进化的系统、连续进化方法及应用
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