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申请/专利权人：杭州佳嘉乐生物技术有限公司
摘要：本发明公开了一种高产依克多因的谷氨酸棒杆菌及其应用，属于基因工程技术领域。本发明对谷氨酸棒杆菌的基因组进行了天冬氨酸激酶LysCS301Y、高丝氨酸脱氢酶HomV59A和异柠檬酸脱氢酶ICD起始密码子突变，敲除了基因LysE、PCK和ODX，强化表达了基因FBP、TKT、PYC和PPC，并过表达了ectABC基因簇，从而增强了依克多因前体的积累，极大的促进依克多因的表达量；且能反馈性的抑制依克多因的竞争性产物的合成，增强依克多因前体转化为依克多因的代谢通路；同时转入异源性的依克多因关键合成酶，并通过更加合理的基因元件序列，显著提高依克多因的产量，为依克多因的高效合成和进一步的产业化奠定了基础。
主权项：1.一种高产依克多因的重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述重组谷氨酸棒杆菌将基因组上天冬氨酸激酶、高丝氨酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶的编码基因分别替换为天冬氨酸激酶突变体、高丝氨酸脱氢酶突变体和异柠檬酸脱氢酶突变体的编码基因，敲除了赖氨酸外运体编码基因LysE、磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶编码基因PCK和草酰乙酸脱羧酶编码基因ODX，强化表达了果糖-1,6-二磷酸酶编码基因FBP、转酮醇酶编码基因TKT、丙酮酸羧化酶编码基因PYC和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因PPC，并过表达了L-2,4-二氨基丁酸乙酰转移酶编码基因ectA、L-2,4-二氨基丁酸:2-酮戊二酸转氨酶编码基因ectB和依克多因水解酶编码基因ectC；所述天冬氨酸激酶突变体是将SEQIDNO.1所示序列编码蛋白的第301位丝氨酸替换为酪氨酸；所述高丝氨酸脱氢酶突变体是将SEQIDNO.2所示序列编码蛋白的第59位缬氨酸替换为丙氨酸；所述异柠檬酸脱氢酶突变体是在SEQIDNO.3所示核苷酸序列的基础上将起始密码子ATG替换为GTG。
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百度查询： 杭州佳嘉乐生物技术有限公司 一种高产依克多因的谷氨酸棒杆菌及其应用
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