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申请/专利权人：正大天晴药业集团股份有限公司

摘要：本申请属于医药化学领域，具体而言，涉及新的作为ERK抑制剂的苯胺嘧啶衍生物及其药学上可接受的盐，具体涉及式I所示化合物及其药学上可接受的盐、其药物组合物、及其用于治疗受益于ERK抑制的疾病的方法。

主权项：1.式I所示化合物及其药学上可接受的盐： 其中，R1选自三氟甲基、R2选自甲基或羟基甲基；R3选自H或羟基甲基。

全文数据：作为ERK抑制剂的苯胺嘧啶衍生物技术领域[0001]本申请属于医药化学领域，具体而言，涉及作为ERK抑制剂的苯胺嘧啶衍生物、其药学上可接受的盐、其药物组合物、及其用于治疗ERK介导的疾病的方法或用途。背景技术[0002]蛋白激酶构成负责控制细胞内多种信号转导过程的结构上相关的酶的大家族。蛋白激酶由于其结构及催化功能保守而被认为是由共同祖先基因进化而来。几乎所有的激酶均含有类似的具有250-300个氨基酸的催化结构域。所述激酶可根据其磷酸化底物而分类成各家族例如蛋白质-酪氨酸、蛋白质-丝氨酸苏氨酸、脂质等）。[0003]肿瘤生长、进展以及转移所涉及的过程是由在癌细胞中活化的信号传导路径介导。ERK路径通过转播来自结合配体的细胞表面酪氨酸激酶受体例如erbB家族、PDGF、FGF以及VEGF受体酪氨酸激酶的细胞外信号而在调节哺乳动物细胞生长中起着重要作用。ERK路径的活化是经由以Ras的活化开始的磷酸化事件级联。Ras的活化引起Raf—种丝氨酸-苏氨fe激酶）的募集及活化。活化的Raf接着憐酸化并活化MEKl2，后者接着憐酸化并活化ERKl及ERK2中的一或两者。ERKl及ERK2中的一或两者在活化时磷酸化若干参与包括细胞骨架改变及转录活化在内的众多细胞事件的下游标靶。ERKMAPK路径为对于细胞增殖而言最重要的路径之一，且ERKMAPK路径经常在许多肿瘤中活化。[0004]大量的研究已表明，在增殖性疾病如癌症中，遗传突变和或RasRafMEKERK途径中的蛋白激酶的过表达会导致不受控制的细胞增殖和肿瘤的形成。例如，一些癌症包含突变，这些突变将导致由于连续产生生长因子使得该途径连续激活。另一些突变可导致活化的GTP结合的Ras复合物的失活缺陷，再次导致MAP激酶途径的激活处于ERKl及ERK2中的一或两者上游的Ras基因在包括结肠直肠肿瘤、黑色素瘤、乳房肿瘤及胰腺肿瘤在内的若干癌症中突变。在许多人类肿瘤中，高Ras活性伴随有升高的ERK活性。[0005]鉴于在RafRasMEKERK途径中的众多上游（例如RAS、Raf和下游（例如ATF2、c-F〇S、C-Myc信号蛋白已涉及包括但不限于癌症的众多病症，因此ERK已成为药物开发的主要目标。发明内容[0006]本申请提供一种式I所示化合物及其药学上可接受的盐：[0008]其中，R1选自H、甲基、乙基、异丙基、环丙基、三氟甲基甲磺酰基、乙磺酰基、异丙磺酰基或环丙磺酰基；[0009]R2选自H、甲基或羟基甲基；[0010]R3选自H或羟基甲基。[0011]在部分方案中，所述R1选自H、或甲磺酰基。[0012]在部分方案中，所述式I所示化合物选自：[0015]本申请的另一方面提供了一种药物组合物，其包含本文公开的式I化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的辅料。任选地，本申请的药物组合物可以进一步含有一种或多种额外的治疗剂。[0016]本申请的另一方面提供了一种治疗受益于ERK抑制的疾病的方法，所述方法包括给予有需要的个体本申请所述的式I化合物或者其药学上可接受的盐或其药物组合物。[0017]本申请的另一个方面提供了本申请所述的式I化合物或者其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备治疗受益于ERK抑制的疾病的药物中的用途。[0018]在部分方案中，所述受益于ERK抑制的疾病选自癌症、骨病、炎性疾病、免疫疾病、神经系统疾病、代谢性疾病、呼吸性疾病和心脏病。[0019]在部分方案中，所述癌症选自乳腺癌、胰腺癌、非小细胞肺癌NSCLC、甲状腺癌、精原细胞瘤、黑素瘤、膀胱癌、肝癌、肾癌、骨髓增生异常综合征（MDS、急性髓性白血病AML和结直肠癌的癌症。在进一步的实施方案中，该癌症是黑素瘤或结直肠癌。[0020]在一些实施方案中，所述疾病是由ERKl和或ERK2介导的。[0021]定义部分[0022]术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益风险比相称。[0023]作为药学上可接受的盐，例如，与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与酸性氨基酸形成的盐等。[0024]本申请的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是:在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离碱形式的这些化合物与化学计量的适当酸反应来制备。[0025]本申请的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本申请的范围之内。本申请的某些化合物可以以多晶或无定形形式存在。[0026]本申请的药物组合物可通过将本申请的化合物或其盐与适宜的药学上可接受的辅料组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂或微球及气溶胶等。[0027]给予本申请的化合物或其药物可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、透黏膜、经肠给药，或者局部、经皮、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、目艮内、腹膜内、肌内、皮下或静脉内给药。[0028]本申请的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法和冷冻干燥法等。[0029]对于口服给药，可以通过将活性化合物与本领域熟知的药学上可接受的载体混合来配制该药物组合物。这些载体能使本申请的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂或悬浮剂等，用于对患者的□服给药。[0030]可以通过常规的混合、填充或压片方法来制备固体口服组合物。例如，可通过下述方法获得:将所述的活性化合物与固体赋形剂混合，任选地碾磨所得的混合物，如果需要则加入其它合适的辅剂，然后将该混合物加工成颗粒，得到了片剂或糖衣剂的核心。适合的辅料包括但不限于:粘合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、甜味剂和或矫味剂等。如微晶纤维素、葡萄糖溶液、阿拉伯胶楽、明胶溶液、蔗糖和或淀粉糊;滑石、淀粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙和或硬脂酸;乳糖、蔗糖、淀粉、甘露糖醇、山梨糖醇和或磷酸二钙;二氧化硅;交联羧甲基纤维素钠、预交化淀粉、淀粉羟乙酸钠、藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、甲基纤维素、琼月旨、羧甲基纤维素和或交联聚乙烯吡咯烷酮等。可以根据通常药物实践中公知的方法任选地对糖衣剂的核心进行包衣，尤其使用肠溶包衣。[0031]药物组合物还可适用于肠胃外给药，如合适的单位剂型的无菌溶液剂、混悬剂或冻干产品。[0032]在一些实施方式中，本文所述的式（I化合物或其药学上可接受的盐可以通过任何适用的途径和方法给药，例如通过口服或肠胃外（例如，静脉内）给药。式（I化合物的治疗有效量为从约〇.0001到20mgKg体重天，例如从0.001到10mgKg体重天。[0033]在一些实施方式中，式⑴化合物的剂量频率由患者个体的需求决定，例如，每天1次或2次，或每天更多次。给药可以是间歇性的，例如，其中在若干天的期间内，患者接受式I化合物的每日剂量，接着在若干天的期间，患者不接受式I化合物的每日剂量。[0034]本申请所述的化合物可以通过下述通用流程方法制备，具体结构的制备方法在实施例中有详细描述。[0035]流程1:[0037]在流程1中，化合物Al与化合物A2发生格氏反应得化合物A3，化合物A3在碱性条件下与化合物A4发生缩合反应得化合物A5，化合物A5与化合物A6发生缩合反应得化合物A7，化合物A7与化合物A8发生缩合反应得化合物A9，化合物A9的硝基经还原得化合物AlO，化合物AlO与化合物Al1反应得目标化合物I。[0038]在本申请的部分实施方式中，本领域的技术人员可以依据而非严格按照流程1的步骤进行制备，根据终产物的结构，可以对流程1进行增加、减少或者改变各个步骤的顺序，这也属于本申请的范围，例如，当R1选自H时，可以不发生化合物A3与化合物A4发生缩合反应得化合物A5的步骤。[0039]为清楚起见，本申请进一步用实施例来阐述。但是实施例不局限于定义或者指定发明范围。实施例[0040]下面的具体实施例，其目的是使本领域的技术人员能更清楚地理解和实施本申请。它们不应该被认为是对本申请范围的限制，而只是本申请的示例性说明和典型代表。[0041]实施例A2-甲基氨基）乙基氨基）甲醇A8-3[0042]氮气保护下，向250mL三口烧瓶中加入式A8-2化合物（10g，0.135mol，三聚甲醛4.23g，0.047mol，四氯化碳80mL，磁力搅拌使其完全溶解。加热至50°C反应2h。冷却至室温，减压浓缩，向浓缩物中加入乙酸乙酯，饱和碳酸钠溶液分层萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，浓缩物经柱层析提纯（乙酸乙酯石油醚得化合物A8-39.4g,67.2%〇MS：[M+H]+=105[0043]实施例B甲基2-甲基氨基）乙基氨基）甲醇A8-4[0044]氮气保护下，向250mL三口烧瓶中加入式A8-1化合物（10g，0.114mol，三聚甲醛3.6g，0.040mol，四氯化碳80mL，磁力搅拌使其完全溶解。加热至50°C反应2h。冷却至室温，减压浓缩，向浓缩物中加入乙酸乙酯，饱和碳酸钠溶液分层萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，浓缩物经柱层析提纯（乙酸乙酯石油醚得化合物A8-411.3g,83.9%〇MS：[M+H]+=119[0045]实施例C2-甲基氨基）乙基氨基二甲醇A8-5[0046]氮气保护下，向250mL三口烧瓶中加入式A8-2化合物（10g，0.135mol，三聚甲醛8.46g，0.094mol，四氯化碳80mL，磁力搅拌使其完全溶解。加热至50°C反应2h。冷却至室温，减压浓缩，向浓缩物中加入乙酸乙酯，饱和碳酸钠溶液分层萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，浓缩物经柱层析提纯（乙酸乙酯石油醚得化合物A8-511.8g,65.5%〇MS：[M+H]+=135[0047]实施例IN-5-4-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基氨基-4-甲氧基-2-甲基（2-甲基氨基）乙基氨基苯基丙烯酰胺（I-I[0051]步骤1[0052]氮气保护下，向3L的三口烧瓶中依次加入化合物A2150g，1.28mol及干燥的二氯乙烷（I.5L，磁力搅拌使其完全溶解。冰盐浴降温至TC，缓慢滴加甲基溴化镁640mL，3M，滴加过程控制温度-5〜5°C，滴加完毕后，升至室温继续反应0.5h。反应液降温至TC，滴加化合物Al267g，1.79mol，滴加完毕后，升至室温，反应16h。反应完毕后，将反应液倒入冰水2.5L中淬灭，加入二氯甲烷300mL*3萃取，合并有机相，用饱和食盐水（300mL*3洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析提纯PEEA=101〜PEEA=41得化合物A370.Og，23.8%〇MS：[M+H]+=230[0053]步骤2[0054]向500mL的三口烧瓶中，加入化合物A325g，0.109mol、化合物A620.3g，0.109mol、TsOH—水合物（31.lg及2-戊醇（250mL，搅拌使其完全溶解。缓慢升温至105°C，反应20h。反应完毕后，冷却到室温，有大量固体析出，抽滤，滤饼用2-戊醇（50mL洗涤。所得固体依次用二氯甲烷50mL、甲醇50mL打浆除杂30min。抽滤，得化合物A7-114.9g，36.05%〇MS：[M+H]+=380[0055]步骤3[0056]将化合物A7-110g，0.026mol、碳酸钾（10.8g，0.078mol、化合物A8-13.4g，0.039mol及N-甲基吡咯烷酮200mL加入到500mL的三口烧瓶中，磁力搅拌均匀。油浴加热升温至50°C，反应5h。冷却至室温，抽滤，将滤液倒入到水（IL中，大量固体析出，抽滤，滤饼用乙酸乙酯（50mL淋洗，滤饼真空干燥至恒重，得化合物A9-129.1g，83.5%JS:[M+H]+=448[0057]步骤4[0058]将化合物A9-120.0g，0.045mol、Zn29.3g，0.45mol、二氯甲烷（200mL及甲醇200mL，加入到IL的三口烧瓶中，磁力搅拌均匀。降温至TC，缓慢滴加饱和氯化铵水溶液200mL10分钟滴加完毕，滴加完毕后，继续反应2h，溶液颜色变为浅黄色。反应完毕后，向反应体系中滴加饱和碳酸钠溶液（200mL，搅拌，抽滤，所得母液加入二氯甲烷500mL萃取，有机相用饱和氯化钠500mL*3洗涤。无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩得化合物A10-117.5g,93.1%〇MS：[M+H]+=418[0059]步骤5[0060]将化合物AlO-I15g，0·036mol、DIEA9·3g，0·072mol及二氯甲烷（400mL加入到IL的三口烧瓶中，磁力搅拌溶解。氮气置换体系空气三次，反应液降温至-20〜-10°C。在上述温度范围内，滴加丙烯酰氯3·9g，0·043mol，约20分钟滴加完毕。滴加完毕后，-20〜-l〇°C反应20min。反应完毕后，向反应体系加入水（300mL，分液，有机相用饱和食盐水200mL*2洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，浓缩物经柱层析提纯DCMMeOH=501〜201得化合物I-I8.1g，47.6%IS:[11+^+=472;¾NMRDMSO-Cl6:S9.82s，lH,9.32s,lH,8.23d,2H,8.04m,lH,7.78s,lH,7.44s,lH,7.31m,2H,7.24m,lH,6.81s，lH,6.37m,2H,5.71m,lH,3.89s,3H,2.89m,2H,2.70s,3H,2.27s,3H。[0061]参照实施例I的制备方法，根据化合物基团的区别，替换实施例I步骤3中化合物A8-1，得下述化合物：[0064]实施例6N-4-甲氧基-2-甲基（2-甲基氨基）乙基）氨基）-5-4-I-甲磺酰基-IH-吲哚-3-基嘧啶-2-基氨基苯基丙烯酰胺1-6[0069]以实施例1所得化合物A3为原料。[0070]步骤2[0071]氮气保护下，向11^的三口烧瓶中加入化合物六332.^，0.14111〇1及01^3001^，磁力搅拌使其完全溶解。氮气置换体系空气三次，冰盐浴降温至〇°C，分批加入NaH14.0g，0.42mol，有轻微放热现象，加入完毕后，维持TC反应βΟπΰιηΤζΟΓ，滴加甲磺酰氯32.1g，0.28mol，控温T=-5〜5°C。滴加完毕后，升至室温反应2小时。反应结束后，将反应液倒入水2L中，有大量固体析出，抽滤，真空干燥得化合物A5-123.7g，55.11%。[0072]之后参考实施例1的步骤2〜步骤5反应得化合物1-6JS:[11+^+=550;¾匪RDMSO-de:59.72s,1H,8.52m,1H,8.20m,1H,8.03m,1H,7.69s,1H,7.41m,2H,7.17m,lH,6.81s,lH,6.39m,2H,5.68m,lH,3.89s,3H,3.32s,3H,2.82m,2H,2.71s,3H,2.29m,5H。[0073]参照实施例6的制备方法，根据化合物基团的区别，替换实施例6步骤4中化合物A8-1，得下述化合物：[0076]实施例IIN-4-甲氧基-2-甲基（2-甲基氨基）乙基）氨基）-5-4-1-三氟乙基-IH-吲哚-3-基嘧啶-2-基氨基苯基丙烯酰胺I-Il[0080]以实施例1所得化合物A3为原料。[0081]步骤2[0082]氮气保护下，向IL的三口烧瓶中加入化合物A332.Og，0.14mol及DMF300mL，机械搅拌溶解。冰盐浴降温至〇°C，分批加入NaH8.4g，0.209mo1，控制温度T=-5°C〜5°C加入完毕后，维持T=-5°C〜5°C继续反应0.5小时T=-5°C〜5°C下滴加三氟甲磺酸三氟乙酯54.Og，0.236mol，滴加完毕后，恢复到室温，继续反应2小时。将反应液倒入冰水（IL中，有大量固体析出，加入乙酸乙酯（IL，摇匀分液，有机相用饱和食盐水500mL*3洗涤，无水硫酸镁干燥，蒸掉溶剂得化合物A5-238.Og，88%。[0083]之后参考实施例1的步骤2〜步骤5反应得化合物I-IUMS:[11+^+=554;¾NMRDMSO-de:59.62s,1H,8.49m,1H,8.05m,2H,7.60s,1H,7.28m,2H,7.09m,1H,6.76s,lH,6.37m,2H,5.62m,lH,3.77s,3H,3.25s,3H,2.75m,5H,2.29m,5H。[0084]参照实施例11的制备方法，根据化合物基团的区别，替换实施例11步骤4中化合物A8-1，得下述化合物：[0087]实验例IERK的抑制试验[0088]用Z’-LYTE激酶测定试剂盒检测本申请化合物对ERK的抑制活性，其用SerThr3肽底物确定。针对ERK2的ATPKm，在ΙΟΟμΜATP条件下，以浓度为0.47ngAiL的ERK2酶进行检测。化合物以所需浓度的100倍在DMSO中以1:3稀释度稀释，之后用20mMHEPES缓冲液进一步稀释（1:25以制备4X待测溶液。待检测化合物溶液最终浓度为1%。每孔板的检测溶液体积为20yL。活性检测反应1小时，用酶标仪检测上清液中酶含量，所得数据经分析计算，得出各化合物的IC50，实验结果如下所示：[0090]本申请化合物的体外ERK2IC50数据用以下符号表示:AIC50彡50nM、B50nMIC50彡IOOnM、Ca〇〇nMIC50彡200nM。

权利要求：1.式I所示化合物及其药学上可接受的盐：其中，R1选自H、甲基、乙基、异丙基、环丙基、三氟甲基甲磺酰基、V乙磺酰基、异丙磺酰基或环丙磺酰基；R2选自H、甲基或羟基甲基；R3选自H或羟基甲基。2.根据权利要求1所述的式I所示化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述R1选自H.或甲磺酰基。3.根据权利要求1所述的式I所示化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，选自：4.药物组合物，其包含如权利要求1-3任一项所述的化合物及其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的辅料。5.治疗受益于ERK抑制的疾病的方法，所述方法包括给予有需要的个体如权利要求1-3任一项所述的化合物及其药学上可接受的盐或权利要求4所述的药物组合物。6.权利要求1-3任一项所述的化合物及其药学上可接受的盐或者权利要求4所述的药物组合物在制备治疗受益于ERK抑制的疾病的药物中的用途。7.根据权利要求5所述的方法或权利要求6所述的用途，其特征在于，所述受益于ERK抑制的疾病选自癌症、骨病、炎性疾病、免疫疾病、神经系统疾病、代谢性疾病、呼吸性疾病和心脏病。8.根据权利要求7所述的方法或用途，其特征在于，所述癌症选自乳腺癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、甲状腺癌、精原细胞瘤、黑素瘤、膀胱癌、肝癌、肾癌、骨髓增生异常综合征、急性髓性白血病和结直肠癌的癌症。9.根据权利要求8所述的方法或用途，其特征在于，所述癌症选自黑素瘤或结直肠癌。

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