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申请/专利权人：重庆希尔康血液净化器材研发有限公司

摘要：本申请涉及医疗器械领域，具体公开了一种用于特异性清除内毒素的吸附材料及其制备方法和应用。该吸附材料改性淀粉微球以及用于特异性吸附内毒素的内毒素亲和肽，内毒素亲和肽通过戊二醛或EDCNHS固定在改性淀粉微球上。本申请通过将采用噬菌体展示技术筛选到的特异性结合配体固定在改性淀粉微球上，能够有针对性的吸附血液中的内毒素，而对其他血液成分没有影响，特异性强，能够实现对血液中微量内毒素进行精准清除。同时以改性淀粉微球为载体，获得一种安全、高效的吸附材料，能够降低人体循环致病物质和有害的前炎性介质的产生。

主权项：1.一种用于清除内毒素的吸附材料的制备方法，其特征在于，其包括：采用交联剂对可溶性淀粉进行改性处理，得到改性淀粉微球，所述改性淀粉微球的表面带有羟基或酰基，将所述改性淀粉微球悬浮于生理盐水中；将内毒素亲和肽溶解于缓冲液中，与活化后的所述改性淀粉微球溶液混合，在恒温条件下震荡孵化，将所述内毒素亲和肽固定于所述改性淀粉微球上，随后用BSA进行封闭处理；所述内毒素亲和肽是通过噬菌体展示技术得到的特异性短肽，所述内毒素亲和肽的氨基酸序列为：Cys-Thr-Ser-Pro-Arg-Leu-Gly-His-Arg；所述交联剂为戊二醛或环氧氯丙烷；当所述交联剂为戊二醛时，制备所述吸附材料的步骤包括：将可溶性淀粉溶解在碱液中，得到分散相，将所述分散相与含有表面活性剂的液体石蜡混合，随后加入体积比为3-5％的戊二醛于60-70℃下交联2-3h，得到表面带有酰基的改性淀粉微球；将表面带有酰基的改性淀粉微球分散在pH为7.5-8.0的PBS缓冲溶液中,再加入溶解于缓冲液中的所述内毒素亲和肽，于2-6℃下共同孵育20-40min，随后加入0.1-0.2wt％的BSA进行封闭；所述内毒素亲和肽与所述改性淀粉微球的质量比为1:7-10；当所述交联剂为环氧氯丙烷时，制备所述吸附材料的步骤包括：将可溶性淀粉溶解在碱液中，得到分散相，将所述分散相与含有表面活性剂的液体石蜡混合，搅拌均匀中加入体积比为6-7％环氧氯丙烷于50-60℃下交联1-2h，得到表面带有羟基的改性淀粉微球；将所述表面带有羟基的改性淀粉微球悬浮于pH为5-6之间的缓冲液中，加入活化剂EDC和NHS，得到活化后的所述改性淀粉微球；再将内毒素亲和肽加入至活化后的所述改性淀粉微球溶液中，于常温下进行共同孵育1-2h，随后加入0.1-0.2wt％的BSA进行封闭；所述内毒素亲和肽与所述改性淀粉微球的质量比为1:12-15。

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