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申请/专利权人：浙江工业大学
摘要：本发明公开一种莽吉柿果皮来源外泌体样纳米囊泡及其制备方法与应用，本发明首先通过酶消化去除高纤维或高果胶的植物组织中影响外泌体样纳米囊泡沉降的杂质，再通过均质、差速离心、超速离心，蔗糖密度梯度离心，最后过滤的方法，能够高效获得高纯度的外泌体样纳米囊泡。本发明方法制备的莽吉柿果皮来源的外泌体样纳米囊泡可以被免疫细胞与肿瘤细胞摄取，具有跨物种特性，兼具抗胶质瘤能力和免疫刺激能力，有望为胶质瘤的治疗提供一种新方法。
主权项：1.一种莽吉柿果皮来源外泌体样纳米囊泡，其特征在于，所述外泌体样纳米囊泡按如下方法制备得到：1酶消化：新鲜莽吉柿果皮块，浸入PBS中，加入酶于37℃消化2h；2捣碎匀浆：步骤1消化后的混合物调节pH至中性，然后在4℃预冷的PBS中捣碎匀浆后过300目滤网，收集滤液；3差速离心：步骤2收集的滤液先在2000-4000×g，4℃低速离心0.5-1h，收集上清；再在10000-20000×g，4℃高速离心0.5-1.5h，收集上清；4超速离心：步骤3上清在100000-150000×g，4℃条件下离心1-2h，收集沉淀用0.02MpH7.4Tris-HCl缓冲液重悬；5蔗糖密度梯度纯化：用0.02MpH7.4的Tris-HCl分别配制蔗糖质量浓度8-60％的蔗糖溶液，按照浓度由高到低依次加入超速离心管中，最后加入步骤4重悬液，150000×g，4℃离心2h，收集30％-45％蔗糖溶液层；6过滤：步骤5蔗糖溶液层在5000×g，4℃条件下离心0.5h，沉淀用0.02MpH7.4Tris-HCl缓冲液重悬，过0.22μM的滤网，收集截流液，得到外泌体样纳米囊泡。
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百度查询： 浙江工业大学 一种莽吉柿果皮来源外泌体样纳米囊泡及其制备方法与应用
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