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申请/专利权人：江南大学
摘要：本发明公开了一种重组大肠杆菌及其构建方法与其在生产3‑脱氢莽草酸中的应用，属于生物工程技术领域。本发明所述重组大肠杆菌，以大肠杆菌SA01为出发菌株，敲除了3‑脱氢莽草酸脱氢酶编码基因aroE，负调控转录抑制因子编码基因tyrR和磷酸烯醇式丙酮酸磷酸转移酶编码基因ptsH，并过量半乳糖透性酶基因galP和抗反馈抑制的DHAP合成酶编码基因aroFfbr，最终得到的重组菌株发酵40h，3‑脱氢莽草酸产量达到了117gL，对葡萄糖得率达到0.52gg。本发明发酵生产3‑脱氢莽草酸的工艺操作简单易行，无需额外添加抗生素，周期短且得率高，培养基成本低廉，适用于工业化生产。
主权项：1.一种重组菌，其特征在于，所述重组菌株与出发菌株相比，具有降低或消失的3-脱氢莽草酸脱氢酶的酶活性和或其编码基因的表达水平，并且，还具有如下1～5任一所示的特性：1增强的3-脱氢奎尼酸合酶以及3-脱氢奎尼酸脱水酶的酶活性和或其编码基因的表达水平，降低或消失的乙酸激酶以及丙酮酸激酶的酶活性和或其编码基因的表达水平；2增强的转酮醇酶以及3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶的酶活性和或其编码基因的表达水平，降低或消失的磷酸烯醇式丙酮酸磷酸转移酶以及丙酮酸脱氢酶的酶活性和或其编码基因的表达水平；3增强的半乳糖透性酶以及3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶的酶活性和或其编码基因的表达水平，降低或消失的负调控转录抑制因子TyrR以及磷酸烯醇式丙酮酸磷酸转移酶的蛋白表达量和或其编码基因的表达水平；4增强的DHAP合成酶以及3-脱氢奎尼酸合酶的酶活性和或其编码基因的表达水平，降低或消失的丙酮酸激酶以及负调控转录抑制因子TyrR的蛋白表达量和或其编码基因的表达水平；5增强的磷酸烯醇式丙酮酸合酶以及转酮醇酶的酶活性和或其编码基因的表达水平，降低或消失的负调控转录抑制因子TyrR以及乳酸脱氢酶的蛋白表达量和或其编码基因的表达水平；所述出发菌株包括大肠杆菌SA01。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一种重组大肠杆菌及其构建方法与其在生产3-脱氢莽草酸中的应用
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