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申请/专利权人：AB工作室有限公司
摘要：本公开涉及双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段以不同的结合亲和力特异性结合两种不同抗原。
主权项：1.一种制备双特异性抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括：（a）选择第一抗原和第二抗原，并鉴定与所述第一抗原结合的第一抗体或其抗原结合片段以及与所述第二抗原结合的第二抗体或其抗原结合片段，其中所述第一抗体或其抗原结合片段包含第一重链可变区VHa和第一轻链可变区VLa，并且所述第二抗体或其抗原结合片段包含第二重链可变区VHb和第二轻链可变区VLb；（b）确定VHa、VLa、VHb和VLb的氨基酸序列；（c）比对VLa和VLb的氨基酸序列，并确定VLa和VLb之间的序列同源性大于80％；（d）基于VHa、VLa、VHb和VLb的3D结构来设计共同的轻链可变区VLc，其中当VLc与VHa缔合时，所述VLc保持对所述第一抗原的亲和力，并且所述VLc-VHb与所述第二抗原的结合亲和力降低，其中步骤（d）进一步包括：（i）如果所述VLa中的氨基酸鉴定为当与VHb配对时对结合所述第二抗原重要，而当与VHa配对时不涉及与所述第一抗原的结合，则将VLa中的氨基酸更改为VLb中的相应氨基酸；并且（ii）重复步骤（i）直到获得所述VLc；（e）使用计算机建模工具重新设计VHa和VHb序列，从而获得VHa'和VHb'，以增加第一蛋白质和第二蛋白质之间的等电点的差异，其中所述第一蛋白质包含两个各自含有VHa'的多肽和两个各自含有VLc的多肽，并且所述第二蛋白质包含两个各自含有VHb'的多肽和两个各自含有VLc的多肽；并且（f）产生具有两个轻链可变区和两个重链可变区的双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述两个轻链可变区各自包含VLc，并且所述两个重链可变区分别包含VHa'和VHb'，其中VHa'和VLc彼此缔合，形成与所述第一抗原特异性结合的第一抗原结合区，并且VHb'和VLc彼此缔和，形成与所述第二抗原特异性结合的第二抗原结合区，其中所述第一抗原结合区与所述第一抗原结合时的结合亲和力至少比所述第二抗原结合区与所述第二抗原结合时的结合亲和力大100倍。
全文数据：
权利要求：
百度查询： AB工作室有限公司 双特异性抗体及其用途
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