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申请/专利权人:山西大学
摘要:本发明属于酶催化领域,具体涉及一种转氨酶连续化反应制备手性胺的方法。该方法将转氨酶与辅因子分散在PBS缓冲液中形成混合液;然后将混合液加入到含有界面活性固体SiO2纳米颗粒的油相中,经高速搅拌形成包封转氨酶和辅因子的油包水型Pickering乳液;最后将Pickering乳液装入固定床反应器中进行连续流动反应制备手性胺。本发明操作简单,连续运行600小时以上,反应转化率基本维持不变,辅因子总转化数可高达5000以上,且转氨酶活性基本维持不变,辅因子也基本没有损失。
主权项:1.一种转氨酶连续化反应制备手性胺的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:将SiO2纳米颗粒超声分散于甲苯中,然后加入疏水硅烷和有机胺;在氮气保护下,搅拌回流;经离心分离,洗涤,干燥,得到具有界面活性的SiO2纳米颗粒;步骤2:将步骤1得到的具有界面活性的SiO2纳米颗粒加入到有机溶剂中,超声分散均匀后获得油相体系;将转氨酶和辅因子加入到PBS缓冲溶液中,混合均匀后得到水相体系;将油水两相体系混合,经高速搅拌形成包封转氨酶和辅因子的粒径均一的油包水型Pickering乳液;步骤3:将步骤2得到的油包水型Pickering乳液装入固定床反应器中,通过恒流泵从固定床上端输送反应物溶液,并向反应物溶液中添加辅酶再生物,产物从固定床下端收集;所述步骤2中转氨酶为ATA-101~ATA-165及其突变体中的一种或多种;辅因子为磷酸吡哆醛、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸。
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