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申请/专利权人：厦门大学
摘要：一种用于提高大肠杆菌生物合成靛玉红产物选择性的方法，涉及酶工程及发酵工程领域。包括：1定向进化：通过对野生型黄素单加氧酶fmo随机突变，结合高通量筛选方法，定向进化出具有更高酶活及酶催化选择性的突变体fmo5B4；2基因表达载体的构建：利用酶切连接技术将突变体fmo5B4插入表达质粒中，对表达质粒进行启动子及核糖体结合位点更换；3大肠杆菌转染和表达：将改造后的表达质粒转入大肠杆菌宿主细胞中，通过诱导表达使突变体fmo5B4得以表达；4发酵条件优化：大肠杆菌在摇瓶中发酵，发酵过程中对发酵体系内溶解氧含量和pH值进行控制，以确保酶活性和产物稳定，提高靛玉红的选择性。提高靛玉红的生产效率。
主权项：1.一种用于提高大肠杆菌生物合成靛玉红产物选择性的方法，其特征在于包括以下步骤：1定向进化：通过对野生型黄素单加氧酶fmo进行随机突变，结合高通量筛选方法，定向进化出具有更高酶活以及酶催化选择性的突变体fmo5B4；2基因表达载体的构建：利用酶切连接技术将步骤1得到的突变体fmo5B4插入表达质粒中，对表达质粒进行启动子及核糖体结合位点更换；3大肠杆菌转染和表达：将改造后的表达质粒转入大肠杆菌宿主细胞中，通过诱导表达使突变体fmo5B4得以表达；4发酵条件优化：完成步骤3后的大肠杆菌在摇瓶中进行发酵，发酵过程中对发酵体系内溶解氧含量和pH值进行控制，以确保酶活性和产物稳定，提高靛玉红的选择性。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 厦门大学 一种用于提高大肠杆菌生物合成靛玉红产物选择性的方法
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