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申请/专利权人:斯坦德科创医药科技(青岛)有限公司
摘要:本发明属于蛋白质组学研究的技术领域,提供了一种植物种子的蛋白质组学前处理方法,包括:步骤S1,在蛋白样品中,加入Rapigest和蛋白酶抑制剂,混匀后于95℃~100℃进行水浴;步骤S2,在步骤S1的体系中加入终浓度为5mM的还原剂和终浓度为10mM的烷基化剂,室温混匀后,避光进行还原烷基化反应;步骤S3,在步骤S2的体系中,按照胰蛋白酶:样品的质量比为1:10~1:30的比例加入胰蛋白酶充分混匀,在37℃进行酶解得到酶解肽段。本发明提供的方法不仅适用于微量谷物蛋白质样品,也适用于常规量的谷物蛋白质样品,低成本易实施,具有普适性,克服了目前质谱微量谷物样品蛋白质组学前处理时间长、多肽获得效率低的问题。
主权项:1.一种植物种子的蛋白质组学前处理方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1,在蛋白样品中,加入Rapigest和蛋白酶抑制剂,混匀后于95℃~100℃进行水浴;步骤S2,在步骤S1的体系中加入终浓度为5mM的还原剂和终浓度为10mM的烷基化剂,室温混匀后,避光进行还原烷基化反应;步骤S3,在步骤S2的体系中,按照胰蛋白酶:样品的质量比为1:10~1:30的比例加入所述胰蛋白酶充分混匀,在37℃进行酶解得到酶解肽段。
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