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申请/专利权人：延边大学

摘要：本发明公开了东当归多糖在预防肺癌药物中的应用及其研究方法，涉及生物医药技术领域。本发明中对东当归多糖的水提醇沉法和超声法提取工艺进行优化，使用HPLC‑CAD法准确测定了东当归多糖中的单糖含量，为天然植物多糖的含量测定提供了新的检测方法；此外，本发明中还通过东当归多糖对MLE‑12细胞活力及线粒体影响的研究，发现东当归多糖可以显著抑制由NNK引起的MLE‑12细胞ROS水平的升高，改善线粒体膜电位；并且发现东当归多糖可能通过调控NLRP3、NEK7、ASC、Cleaved‑caspase‑1、GSDMD等NLRP3炎性小体通路相关蛋白表达，发挥肺癌预防作用，为东当归的临床应用提供了科学依据。

主权项：1.东当归多糖在制备预防肺癌药物中的应用；所述东当归多糖的提取纯化包括以下步骤，S1：通过水提醇沉法或超声法从东当归中提取东当归粗多糖；S2：通过Sevag法除去东当归粗多糖中的蛋白；S3：取步骤S2中得到的溶液，上树脂柱，蒸馏水冲洗，收集流出液浓缩后冷冻干燥；通过水提醇沉法从东当归中提取东当归多糖的具体操作包括以下步骤，S1a：将干燥的东当归根粉碎过筛，加入80％乙醇进行抽滤，干燥得粉末；S2a：将步骤S1a中得到的粉末用85℃热水浸提两次，每次2h，料液比1:10；S3a：合并上清液，调节pH至4.5，抽滤浓缩，加入4倍体积95％乙醇，静置过夜；S4a：取步骤S3a中得到的沉淀，依次用无水乙醇、丙酮洗涤后干燥；或者包括以下步骤：S1b：将干燥的东当归根切成小块，用75％乙醇浸泡一周；乙醇浸泡的料液比为1:10；S2b：抽滤后用100℃热水浸提两次，每次30min，料液比1:30；S3b：合并上清液，加入无水乙醇至终浓度含80％乙醇，搅拌后于4℃冷藏过夜；S4b：对步骤S3b中得到的溶液进行离心处理，用95％乙醇脱色至上清液无色，沉淀干燥；离心操作的转速为4000r、离心时间10min；通过超声法从东当归中提取东当归多糖的具体操作包括以下步骤，S1c：取干燥东当归根粉碎过筛，用95％乙醇溶液处理，抽滤，干燥得粉末；S2c：超声提取，温度37℃，功率500W，料液比1:20，超声提取2次，每次60min；S3c：合并上清液，加入4倍体积95％乙醇，减压浓缩；S4c：静置过夜后抽滤，丙酮清洗，干燥。

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