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感染性PRRSV的PMA-qPCR通用检测试剂盒和三重鉴别试剂盒 

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申请/专利权人:扬州大学

摘要:本发明公开了一种感染性PRRSV的PMA‑qPCR通用检测试剂盒以及一种三重鉴别试剂盒。本发明使用PMA‑qPCR的通用检测试剂盒可以检测待检样品中所有类型PRRSV毒株的感染性病毒。本发明使用PMA‑qPCR的三重鉴别试剂盒可以同时鉴别待检样品中HP‑PRRSV2、NADC30‑likePRRSV2和NADC34‑likePRRSV2感染性病毒,能够快速、高效、准确的对我国猪群中不同感染性PRRSV流行株感染情况进行鉴别。本发明使用PMA‑qPCR的通用检测试剂盒以及三重鉴别试剂盒均能在保持强特异性的情况下,其敏感性比普通PCR方法还要高出10‑100倍。

主权项:1.一种感染性PRRSV的PMA-qPCR通用检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括一对引物对和一条探针,所述一对引物对和一条探针序列如下:PRRSV2-UF1:5’-TTGTGCTTGCTAGGCCGCA-3’,PRRSV2-UR1:5’-GACGACAAATGCGTGGTTATCA-3’,PRRSV-14700UP:5’-FAM-TTCTGGCCCCTGCCCA-MGB-3’;所述引物对和探针所在基因为ORF6;所述试剂盒还包括PMA,所述PMA浓度为1μM~5μM,所述PMA预处理感染性PRRSV的结合温度为37°C,PMA结合时间为10min,PMA最佳蓝光照射光解时间为20min~25min,病毒样品灭活最佳温度为72°C~80°C,最佳灭活时间为10min~20min,所述引物对的浓度均为10μM,所述引物对用量均为0.2μL,所述探针的浓度为10μM,所述探针用量为0.1μL。

全文数据:

权利要求:

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