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申请/专利权人：广东互信生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种黑盾胡蜂蜂毒质量的指纹图谱评价方法，涉及指纹图谱技术领域。其具体包括如下步骤：1对照品溶液的制备；2供试品溶液的制备；3HPLC色谱条件为；4建立标准指纹图谱；5质量评价方法。该方法对供试品无需前处理，重现性、稳定性良好，精密度高，具有良好的专属性，所得指纹图谱中特征峰多，可对黑盾胡蜂蜂毒进行全面评价和质量控制。
主权项：1.一种黑盾胡蜂蜂毒质量的指纹图谱评价方法，包括如下步骤：1对照品溶液的制备：称取5-羟色胺对照品、多巴胺对照品及自制样品Vb-MLP12a、，以超纯水溶解并定容，摇匀，用微孔滤膜过滤，制成单独对照品溶液；2供试品溶液的制备：称取黑盾胡蜂蜂毒样品，以超纯水溶解并定容，摇匀，用微孔滤膜过滤，制成供试品溶液；3HPLC色谱条件为：色谱柱为耐酸性的反相色谱柱UltimateLP-C184.6*250mm，5μm，300A，柱温为30～40℃；检测波长为276～277nm；总流速为0.8～1.2mlmin，流动相A：0.1％三氟乙酸-水，流动相B：0.1％三氟乙酸-乙腈，采用梯度洗脱，采集时间60min,洗脱程序为：0～45min，A:97％～30％，B：3％～70％；45～60min，A:30％～30％，B70％～70％；4建立标准指纹图谱：分别进样步骤12所得溶液，照高效液相色谱法测定，记录色谱图，依据所得的21批黑盾胡蜂蜂毒的指纹图谱，建立标准指纹图谱；5质量评价方法：分析所得供试品指纹图谱，应同时满足以下合格药材标准A、B和C：A:供试品指纹图谱至少含有15个特征峰，其中应包括多巴胺、5-羟色胺及黑盾胡蜂特征多肽Vb-MLP12a；B：供试品指纹图谱经中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件进行评价，与标准指纹图谱相似度应≥0.98；C：供试品指纹图谱中，以面积归一化法计算，Vb-MLP12a含量≥25％。
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